육미지황탕엑스 과립

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)
칼 럼 : 안지름 약 4 〜 6 mm, 길이 15 〜 25 cm인 스
테인레스강관에 입자 크기가 5 〜 10 μm인 액체크로마
토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.
이동상 : 물·아세토니트릴·아세트산혼합액(86 : 14 : 1)
유 량 :1.0 mL/분
(제 2 법) 목단피 중 패오니플로린 이 약 1회 용량(품
목에 따라 조절 가능)을 정밀하게 달아 50 % 메탄올
40 mL를 넣고 30분 초음파 추출한 다음 여과한다. 여
액에 50 % 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여
검액으로 한다. 따로 패오니플로린 표준품 각각 20 mg
을 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 정확하게 5 mL로 한
것을 표준원액으로 한다. 표준원액 1 mL를 정확하게
취하고 메탄올을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 표준액
으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩 정확하게 취하여
다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여,
검액의 각 지표성분의 피크면적을 AT 및 표준액에서
얻은 각 지표성분의 피크면적 AS를 측정한다
패오니플로린의 양(mg)

= 패오니플로린 표준품의 양(mg) ×  × 1


고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 91 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 240 nm)
칼   럼 : 안지름 약 4 ∼ 6 mm, 길이 15 ∼ 25 cm인
스테인레스강관에 5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프
용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이
단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 희석시킨 인산(5→10000)
이동상 B - 아세토니트릴에 희석시킨 인산(5→10000)
시간 (분)       A (%)     B (%)
0 ~ 15     86 → 75   14 → 25
15 ~ 30     75 → 50   25 → 50
30 ~ 35     50 → 30   50 → 70
35 ~ 40     30 → 86   70 → 14
40 ~ 45        86        14
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 91 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 370 nm)
칼 럼 : 안지름 4 mm, 길이 12.5 cm인 스테인레스강관
에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔
을 충전한다.
칼럼온도 : 25 ℃
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단
계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 인산 0.3 g을 물 1000 mL에 녹이고 인산
으로 pH를 2.0으로 조정한다.
이동상 B - 메탄올
이동상 A      이동상 B
시간 (분)
(vol%)     (vol%)
0             60         40
1             60         40
20             45         55
21             0         100
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 92 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 214 nm)
칼 럼 : 안지름 4 〜 6 mm, 길이 15 〜 25 cm인 스테
인레스 강관에 입자 크기가 5 〜 10 μm인 액체크로마
토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.
이동상 : 물·아세토니트릴혼합액(72 : 28)
유 량 : 1.0 mL/min

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 93 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 270 nm)
칼 럼 : 안지름 4 ∼ 6 mm, 길이 15 ∼ 25 cm인 스테
인레스강관에 5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타
데실릴실리카겔을 충전한다.
칼럼온도 : 30 ℃ 부근의 일정 온도
이동상 : 이동상A 및 이동상B를 가지고 아래와 같이 단
계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 희석시킨 트리플루오로아세트산(1→
1000)·메탄올혼합액(95:5)
이동상 B - 메탄올·희석시킨 트리플루오로아세트산(1
→1000)혼합액(95:5)
이동상 A    이동상 B
시간(분)
(vol%)    (vol%)
0        75        25
30        45        55
35        75        25
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 95 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254nm)
칼 럼 : 안지름 4 〜 6 mm, 길이 15 〜 25 cm인 스테
인레스강관에 입자 크기가 5 〜 10 μm인 액체크로마토
그래프용옥타데실실릴화한실리카겔을 충전한다.
이 동 상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이
단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 물·메탄올·포름산혼합액(90 : 10 : 0.1)
이동상 B - 메탄올·물·포름산혼합액(90 : 10 : 0.1)
시간(분)      이동상 A (vol%) 이동상 B (vol%)
0            100              0
15             70              30
25             30              70
30             30              70
35            100              0
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 96 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 : 203 nm)
칼 럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 15 cm의 스테인레스강관
에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔
을 충전한다.
칼럼온도 : 30 ℃ 부근의 일정온도
이동상 : 물·아세토니트릴혼합액(4 : 1)
유 량 : 진세노시드 Rg1의 유지시간이 약 25 분이 되도
록 조정한다.

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 97 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 : 203 nm)
칼 럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 15 cm의 스테인레스강관
에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔
을 충전한다.
칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도
이동상 : 물·아세토니트릴혼합액(7 : 3)
유 량 : 진세노시드 Rb1의 유지시간이 약 20 분이 되도
록 조정한다.

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 97 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)
칼 럼 : 안지름 4 〜 6 mm, 길이 15〜25 cm인 스테인
레스강관에 5 〜 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데
실실릴실리카겔을 충전한다.
칼럼온도 : 상온
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이 단
계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 물
이동상 B - 아세토니트릴
이동상 A       이동상 B
시간(분)
(vol%)      (vol%)
0           90              10
15          90              10
30          80              20
45          65              35
48          50              50
55          50              50
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 101 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 260 nm)
칼 럼 : 안지름 4 〜 6 mm, 길이 15 〜25 cm인 스테인
레스강관에 입자 크기가 5 〜 10 μm인 액체크로마토그
래프용옥타데실실릴화한실리카겔을 충전한다.
칼럼 온도 : 25 ℃ 부근의 일정 온도
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이 단
계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 트리플루오로아세트산용액(0.5 → 1000)
이동상 B - 메탄올
이동상 A       이동상 B
시간(분)
(vol%)      (vol%)
0             90         10
4             80         20
6             60         40
10             50         50
16              0         100
22              0         100
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 105 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 313 nm)
칼 럼 : 안지름 4 〜 6 mm, 길이 15 〜 25 cm인 스테
인레스강관에 5 〜 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타
데실실릴실리카겔을 충전한다.
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이 단
계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 희석시킨 아세트산(1 → 100)
이동상 B - 아세토니트릴 ·아세트산혼합액(100 : 1)
이동상 A        이동상 B
시간(분)
(vol%)      (vol%)
0            90           10
30           35           65
35           10           90
40           10           90
45           90           10
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 106 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 280 nm)
칼 럼 : 안지름 4 〜 6 mm, 길이 15 〜 25 cm인 스테
인레스강관에 5 〜 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타
데실실릴실리카겔을 충전한다.
칼럼온도 : 상온
이동상 : 물· 메탄올혼합액(60 : 40)
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 108 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 270 nm)
칼 럼 : 안지름 4 ∼ 6 mm, 길이 15 ∼ 25 cm인 스테
인레스강관에 5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용 옥
타데실실릴실리카겔을 충전한다.
칼럼온도 : 30 ℃
이동상 : 이동상A 및 이동상B를 가지고 아래와 같이 단
계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상A - 포름산용액(1 → 1000)
이동상B - 포름산아세토니트릴혼합액(1 → 1000)
이동상A       이동상B
시간(분)
(vol %)    (vol %)
0              98         2
25              90         10
30              85         15
유 량 : 1.0 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 112 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254nm)
칼    럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강
관에 입자 크기가 5 μm인 액체크로마토그래프용옥타데
실실릴화한실리카겔을 충전한다.
칼럼 온도 : 35 ℃ 부근의 일정 온도
이 동 상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이
단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 희석시킨 아세트산(1 → 100)
이동상 B - 아세토니트릴·아세트산(100)혼합액(99 : 1)
이동상 A          이동상 B
시간(분)
(vol%)         (vol%)
0              90             10
8              85             15
35              85             15
40              80             20
45               0            100
유 량 : 0.6 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 118 쪽)

검출기 : 형광광도계(여기파장 294 nm, 형광파장 404
nm)
칼 럼 : Supelcosil LC-PAH (4.6 × 250 mm, 5 μm
는 이와 동등한 것
칼럼온도 : 37 ℃
이동상 : 아세토니트릴·물혼합액(4 : 1)
유 량 : 1.0 mL/분
② 정성시험 : 위의 조건으로 얻어진 검액 크로마토그램상
의 각 피크를 표준액의 피크와 비교할 때 유지시간의 일
치 여부를 확인한다.
③ 정량시험 : 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음
조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 표준
액에서 얻은 내부표준물질 피크면적에 대한 벤조피렌의
피크면적비[AS/AIS]를 Y축으로 하고 벤조피렌의 농도를
X축으로 하여 만든 검량선을 작성하고, 검액의 내부표준
물질    피크면적에       대한     벤조피렌의       피크면적비
[ASAM/ASAMIS]를 Y축에 대입하여 벤조피렌의 농도를 구한
다.
AS : 검량선 표준액의 표준물질 피크면적
AIS : 검량선 표준액의 내부표준물질 피크면적
ASAM : 검액의 벤조피렌 피크면적
ASAMIS : 검액의 내부표준물질 피크면적
(제 2 법) 기체크로마토그래프법
가) 검액 조제
① 추출 : 이 약 500 ~ 600 g을 분쇄하여 균질화한 후
약 5.0 g을 정밀하게 달아 물 50 mL를 넣어 30 분간 초
음파 추출한다. 여기에 헥산 100 mL 및 내부표준용액
0.25 mL를 넣어 10 분간 진탕 추출한 다음 30 분간 초
음파 추출한다. 원심분리(3,200 g, 10 분)하여 헥산층을
분액깔대기(I)에 옮긴다. 분액깔대기(I)의 헥산층에 N,N-
디메틸포름아미드·물혼합액(9 : 1) 50 mL를 넣고 10
분간 진탕 추출 후 N,N-디메틸포름아미드·물혼합액(9 :
1)층을 분액깔대기(II)에 옮긴다(3회 반복). 분액깔대기
(II)에 1 % 황산나트륨용액 100 mL를 넣어 섞고 헥산
50 mL를 넣고 10 분간 진탕한 후 정치하여 분리된 헥산
층을 분액깔대기(III)로 옮긴다. 분액깔대기(II)에 헥산
35 mL를 넣고 10 분간 진탕 추출한 다음 헥산층을 분액
깔대기(III)에 합한다(2회 반복). 분액깔대기(III)의 헥산
층에 물 50 mL를 넣어 세척하고, 헥산층을 무수황산나트
륨 약 30 g으로 탈수 여과한 다음 45 ℃의 수욕에서 감
압하여 헥산 약 2 mL가 될 때까지 농축한다.
② 정제 : 플로리실카트리지는 미리 디클로로메탄 10 mL
및 헥산 20 mL를 순서대로 초당 2 ~ 3 방울의 속도로
유출시켜 활성화시킨 후 사용한다. 활성화된 카트리지에
위의 추출용액을 넣어 헥산·디클로로메탄혼합액(3 : 1)
20 mL를 초당 2 ~ 3 방울의 속도로 용출시킨다. 이 용
출된 액을 45 ℃ 이하의 수욕에서 질소가스 하에 날려 보
낸 다음 잔류물을 디클로로메탄 5 mL에 녹인 다음 공경
0.45 μm 이하의 멤브레인필터로 여과하여 검액으로 한
다.
) 또   나) 표준액 조제
벤조피렌표준품 및 벤조피렌-d12표준품 적당량을 정밀하
게 달아 각각 디클로로메탄에 녹여 1 mL 당 100 μg을
함유하는 표준원액 및 내부표준원액을 만든다. 이 표준원
액과 내부표준원액 적당량을 취하여 디클로로메탄으로 1
mL 당 1, 2, 5, 10, 25, 50 ng의 벤조피렌과 각각 50
ng의 내부표준물질이 함유되도록 희석하여 표준액으로 한
다.
내부표준용액      벤조피렌-d12표준품으로 제조한 내부표준
원액을 디클로로메탄에 희석하여 1 mL 중 1 μg을 함유
하는 내부표준용액을 만든다.
다) 시약 및 시액
본 실험에 사용한 물은 3 차 증류수 이상의 것을 사용하
고, 시약은 잔류농약시험용 이상의 것을 사용한다.
라) 시험조작
① 검액 및 표준액을 가지고 기체크로마토그래프법에 따
라 다음 조건으로 시험한다.

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 116 쪽)

검출기 : 질량분석기(전자충격이온화, 다중반응검출법)
선구이온     생성이온     충돌에너지
분석성분
(m/z)    (m/z)    (eV)
252.0    250.0     39
벤조피렌
252.0    226.0     24
264.0    260.0     27
벤조피렌-d12
264.0    234.0     36
칼    럼 : 질량분석기용 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의
규산유리제캐필러리칼럼관에         기체크로마토그래프용      5
% 메틸실리콘을 0.25 μm의 두께로 코팅한 것 또는
이와 동등한 것
칼럼온도 : 100 ℃에서 시료를 주입하고 분당 55 ℃의
비율로 230 ℃까지 온도를 상승시키고 분당 5 ℃의 비
율로 320 ℃까지 온도를 상승시켜 2 분간 유지한다.
검체도입부온도 : 250 ℃
인터페이스온도 : 310 ℃
운반기체 : 헬륨
유 량 : 1.5 mL/분
주입방법 : 비분할 주입법
② 정성시험 : 위의 조건으로 얻어진 검액 크로마토그램상
의 각 피크를 표준액의 피크와 비교할 때 유지시간 및 질
량스펙트럼의 일치 여부를 확인한다.
③ 정량시험 : 검량선에서 얻어진 표준물질과 내부표준물
질의 피크에 대한 면적비[AS/AIS]를 Y축으로 하고 표준
물질의 농도를 X축으로 하여 검량선을 작성하고 검액의
피크 면적비[ASAM/ASAMIS]를 Y축에 대입하여 벤조피렌의
농도를 계산한다.
AS : 검량선 표준액의 표준물질 피크면적
AIS : 검량선 표준액의 내부표준물질 피크면적
ASAM : 검액의 벤조피렌 피크면적
ASAMIS : 검액의 내부표준물질 피크면적

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 116 쪽)