비타민B1

(1) 칼럼 : 옥타데실실릴화한 칼럼(안지름 4.6 mm, 길이 250 mm, 충전제 Octadecylsilica) 또
는 이와 동등한 것
(2) 이동상 : 0.1 M 제일인산나트륨용액
(3) 유속 : 0.7 mL/min
(4) 반응액 : 0.01% 페리시안화칼륨·15%(w/v) 수산화나트륨용액(유속 : 0.7 mL/min)
(5) 검출기 : 형광검출기(여기파장 : 375 nm, 측정파장 : 450 nm)
5) 정성시험
위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무
름 시간과 일치하여야 한다.
6) 정량시험
표준용액과 시험용액을 각각 20 μL씩 고속액체크로마토그래프에 주입하고, 칼럼에서 분리
용출시킨     비타민B1 을   반응액    송액펌프에서         보내진   반응액과   자동적으로   혼합시켜
형광물질(티오크롬)로 변환한다. 이 형광물질을 형광검출기로 보내 얻어진 표준용액 피크
면적 또는 높이에 의해 구한 검량선을 이용하여 시험용액의 비타민B1 농도(μg/mL)를 구하고,
다음 식에 의해 검체 중 비타민B1 의 함량(mg/100 g)을 계산한다.
가) 계산방법
비타민B1 의 양(mg/100 g) = S × (a×b)/검체채취량(g) × 100/1,000
S : 시험용액 중의 비타민B1 의 농도(μg/mL)
a : 시험용액의 전량(mL)
b : 시험용액의 희석배수

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