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Peptide Mapping · Reversed-Phase Selectivity

펩타이드 분석 솔루션 — 펩타이드 성질에 맞는 역상 컬럼 고르기

Phenomenex가 역상 컬럼 13종을 같은 조건에서 펩타이드 7종 혼합물과 NIST mAb 트립신 분해물로 비교한 기술노트(TN-1382)를 펩타이드 성질별로 다시 묶었습니다. 극성·산성·염기성·긴 펩타이드·탈아미드 펩타이드마다 어떤 컬럼이 피크 용량과 피크 모양에서 앞섰는지, 무엇부터 시험해 볼지를 정리했습니다.

한눈에 보기극성·당펩타이드산성·염기성긴 펩타이드탈아미드먼저 볼 컬럼

이 페이지를 읽는 법

  • 근거는 Phenomenex 기술노트 TN-1382 한 편입니다. 모든 컬럼을 한 가지 조건(0.2 % 포름산 · 아세토나이트릴 · 65 °C · LC-MS)으로 시험한 결과이며, 수치는 원자료 시험 조건에서 얻은 값입니다. 원문도 «비교 분리 결과가 모든 응용을 대표하지는 않는다»고 적습니다. 다른 시료·이동상·장비에서 같은 결과를 보증하지 않으므로 실제 시험법에서는 직접 확인해야 합니다.
  • 비교 대상은 모두 Phenomenex 컬럼입니다. 타사 컬럼과의 비교는 이 자료에 없습니다.
  • 일반 원리로 표시한 설명은 컬럼피아가 덧붙인 통상적인 설명이며, 이 자료가 측정한 것이 아닙니다.
  • GLP-1 계열 같은 합성 펩타이드 의약품의 유연물질·응집체 분석은 이 자료의 범위 밖입니다 — 비만치료제 분석 솔루션을 보세요.

1. 펩타이드 매핑에서 컬럼 선택이 어려운 이유

역상 LC-MS 펩타이드 매핑은 단백질의 아미노산 서열을 확인하고, 번역 후 변형이나 합성 변형이 어디에 있는지 찾는 데 씁니다. 원문은 이것이 바이오의약품의 핵심 품질 특성(CQA) 평가의 일부이며, 예상하지 못한 변형이 치료제의 안정성과 기능에 영향을 줄 수 있다고 설명합니다.

어려운 점은 펩타이드끼리 물리화학적 성질이 아주 비슷한 경우가 많다는 것입니다. CQA에 해당하는 펩타이드는 양이 적은 경우가 많고, 작은 변형이나 이성질 하나만 다를 수 있습니다. 크기·극성·전하가 제각각이라 용출 순서를 예측하기 어려워, 원문 결론은 여러 컬럼을 스크리닝해야 하는 경우가 많다고 적습니다.

2. 시험 설계

Kinetex — 7종

코어셸 입자. 효율·분리능을 높이도록 설계됐다(원문). C18 · XB-C18 · Polar C18 · PS C18 · Biphenyl · Phenyl-Hexyl · F5, 모두 2.6 µm.

Luna Omega — 3종

전다공성 실리카 입자. 비활성(inertness)과 재현성을 높이도록 설계됐다(원문). C18 · Polar C18 · PS C18, 모두 3 µm.

Biozen Peptide — 3종

BioTi 바이오이너트 하드웨어로 바이오 분자의 선택성·감도를 높이도록 설계됐다(원문). XB-C18 2.6 µm · Polar C18 1.6 µm · PS C18 3 µm.

시료 ① 펩타이드 7종 혼합물 (표 1)

프로테오믹스 LC-MS에서 표준으로 흔히 쓰는 펩타이드로, 극성과 등전점(pI)의 폭이 넓다.

펩타이드서열분자량pIGRAVY
RASG-1RGDSPASSKP1000.498.75-1.61
Angiotensin frag. 1-7DRVYIHP898.466.74-0.77
BradykininRPPGFSPFR1059.5612.00-1.04
Angiotensin IIDRVYIHPF1045.536.74-0.33
Angiotensin IDRVYIHPFHL1295.676.92-0.20
Renin substrateDRVYIHPFHLLVYS1757.926.920.28
Enolase T35WLTGPQLADLYHSLMK1871.966.74-0.06

GRAVY(평균 소수성 지수)는 음수일수록 친수성입니다. 분자량 단위 g/mol.

시료 ② NIST mAb 트립신 분해물

미국 국립표준기술연구소(NIST)의 단일클론항체 표준물질 RM 8671을 환원·알킬화한 뒤 트립신으로 분해했다. 길이 3–58 아미노산의 펩타이드 조각이 50개 넘게 생겼고, 이 가운데 52개를 골라 성질별로 나눴다.

  • 극성: 아미노산 잔기의 35 % 이상이 극성 비하전 잔기. 극성이 큰 당쇄(G0F·G2F)가 붙은 당펩타이드 2개 포함 (표 3)
  • 산성: 서열의 29 % 이상이 산성 잔기(D·E) (표 4)
  • 염기성: 염기성 잔기를 가진 펩타이드 (표 5, 예 AKGQPR 67 %)
  • 긴 펩타이드: 20 잔기 초과 또는 2000 Da 초과 (표 7)
  • 탈아미드: N·Q 잔기의 탈아미드형

LC·MS 조건 (두 시료 공통 부분)

  • 이동상 A: 0.2 % 포름산 / 물 · B: 0.2 % 포름산 / 아세토나이트릴:물(80:20)
  • 컬럼 150 × 2.1 mm · 온도 65 °C · LC Agilent 1260 · 검출 ESI 양이온 · SCIEX ZenoTOF 7600
  • 혼합물: 2 %B(0–2분) → 65 %B(15분) → 85 %B(15.1–17.1분) → 2 %B(17.2–28분), 주입 10 µL, 1.5 ng/µL
  • NIST mAb: 0.5 %B(0–2분) → 50 %B(62–65분) → 95 %B(66분) → 0.5 %B(68–80분), 주입 5 µL, 500 ng/µL
  • 유속: 혼합물 0.200, NIST mAb 0.300 — 원문 단위 표기는 «µL/min»(아래 «원문 표기에서 확인이 필요한 부분» 참조)
  • MS/MS는 EAD(전자 활성화 해리) 조각화, 펩타이드 확인은 SCIEX Biologics Explorer, 데이터 시각화는 Skyline

3. 한눈에 보기 — 13종 × 펩타이드 성질별 피크 용량

피크 용량(peak capacity)은 주어진 분석 시간 안에 몇 개의 피크를 가를 수 있는지를 나타내는 값으로, 높을수록 분리 능력이 크다는 뜻입니다. 원문의 막대그래프 5개를 표 하나로 모았습니다. 범주마다 가장 높은 값을 진하게 표시했습니다. 범주끼리는 쓴 펩타이드가 달라 값의 크기를 서로 비교하지 않습니다.

컬럼 (150 × 2.1 mm)펩타이드 7종 혼합물그림 1극성그림 7산성그림 11염기성그림 13긴 펩타이드그림 16염기성 비대칭도표 6 · 평균
Kinetex 2.6 µm C1800F-4462-AN3945515167155391.18
Kinetex 2.6 µm XB-C1800F-4496-AN4176367046905791.24
Kinetex 2.6 µm Polar C1800F-4759-AN4516705826865631.05
Kinetex 2.6 µm PS C1800F-4780-AN3956527697895761.05
Kinetex 2.6 µm Biphenyl00F-4622-AN3606256366585931.10
Kinetex 2.6 µm Phenyl-Hexyl00F-4495-AN3576647005425771.13
Kinetex 2.6 µm F500F-4723-AN4286656107656091.14
Luna Omega 3 µm C1800F-4784-AN3684655484854471.26
Luna Omega 3 µm Polar C1800F-4760-AN4045935467415431.17
Luna Omega 3 µm PS C1800F-4758-AN3685686506815041.05
Biozen 2.6 µm Peptide XB-C1800F-4768-AN3937187577526681.49
Biozen 1.6 µm Peptide Polar C18품번 확인 필요4106976437326471.22
Biozen 3 µm Peptide PS C18품번 확인 필요3375816486885051.15
  • «펩타이드 7종 혼합물»만 표 1의 표준 펩타이드이고, 나머지 네 범주는 NIST mAb 트립신 분해물의 펩타이드입니다.
  • 비대칭도는 1보다 작으면 앞끌림, 크면 꼬리끌림입니다. 1.05(Kinetex Polar C18 · Kinetex PS C18 · Luna Omega PS C18)가 가장 작습니다.
  • 품번은 원문 표기입니다. 주문 전에는 Phenomenex 제품 페이지나 성문시스텍에서 규격을 확인하세요.

표에서 읽히는 것

  • Biozen Peptide XB-C18이 극성·긴 펩타이드 범주에서 1위, 산성 범주에서 2위였다. 같은 XB-C18 화학의 Kinetex XB-C18보다 산성·염기성·극성·긴 펩타이드 범주 모두 높았다. 원문은 BioTi 바이오이너트 하드웨어가 피크 용량과 재현성에 기여했다고 해석한다.
  • Kinetex PS C18이 산성·염기성 범주 1위였다.
  • Luna Omega(전다공성)는 NIST mAb 펩타이드 범주에서 대체로 낮았다. 다만 피크 용량과 별개로 극성 펩타이드의 머무름·피크 모양, 탈아미드 이성질체 분리에서는 장점이 있었다(아래 4절의 극성·탈아미드 항목).

4. 펩타이드 성질별 결과

펩타이드 7종 혼합물 — 입자 구조와 화학

  • 코어셸 입자 컬럼의 피크 용량이 가장 좋았다. 원문은 코어셸 입자가 비슷한 크기의 전다공성 입자보다 분석물의 물질 전달이 빠르고, 입자 크기 분포가 매우 좁아 띠 넓어짐이 줄어든다고 설명한다.
  • 세 계열 모두 Polar C18이 계열 안에서 가장 높았다(Kinetex 451 · Luna Omega 404 · Biozen 410). 혼합물의 펩타이드 대부분이 친수성이라는 것이 원문의 해석이다.
  • PS C18 세 컬럼은 예상보다 낮았는데, 가장 친수성인 RASG-1(GRAVY −1.61, 양전하를 띠는 염기성 잔기 2개)이 양전하 PS 표면과 반발해 일찍, 나쁜 모양으로 용출됐기 때문이다(반높이 피크 폭 0.1 초과). 이 펩타이드를 빼면 Kinetex PS C18 442, Luna Omega PS C18 402, Biozen Peptide PS C18 373이다.
  • 페닐 계열에서는 Phenyl-Hexyl(357)·Biphenyl(360)이 가장 낮고 F5(428)는 높았다. 세 상 모두 π-π 방향족 상호작용과 극성 상호작용을 주지만 강한 수소결합 능력은 F5에만 있고, 이 시험은 π-π 상호작용을 크게 방해하는 아세토나이트릴을 일부러 썼다는 것이 원문의 설명이다.

극성 펩타이드·당펩타이드

  • Kinetex 계열에서는 Polar C18이 가장 높았고(670), G0F·G2F 당펩타이드를 완전히 분리했다(그림 8). F5· Phenyl-Hexyl·PS C18은 방향족·염기성 잔기가 많은 펩타이드에서 여전히 도움이 됐다.
  • Luna Omega 계열은 계열 전체로 극성 펩타이드 피크 용량이 가장 낮았지만(계열 안에서는 Polar C18 593), Luna Omega Polar C18은 일찍 용출되는 극성 펩타이드의 피크 모양이 Kinetex보다 좋았고 친수성 펩타이드를 더 오래 붙잡았다(그림 9). 원문은 열 개질로 미세기공을 없애 극성 엔드캡 표면과 상호작용할 수 있는 표면적을 최적화한 입자 때문이라고 설명한다.
  • Biozen 계열에서는 Peptide XB-C18이 가장 높았다(718, 13종 중 1위). Biozen 1.6 µm Peptide Polar C18(697)은 당펩타이드의 머무름이 늘었고, 극성 선택성과 1.6 µm 입자의 효율이 합쳐져 EEQYNSTYR의 G2F·G0F 당형을 Biozen 세 컬럼 가운데 가장 크게 갈랐다(아래 그림).
Biozen Peptide Polar C18·XB-C18·PS C18에서 EEQYNSTYR G2F·G0F 당펩타이드와 VTITCSASSR의 추출 이온 크로마토그램(TN-1382 그림 10)
TN-1382 그림 10 — 위부터 Biozen 1.6 µm Peptide Polar C18, 2.6 µm Peptide XB-C18, 3 µm Peptide PS C18. G2F·G0F 당형 사이 분리도 1.07 / 0.44 / 0.44. 출처: Phenomenex.

산성 펩타이드

  • Kinetex 2.6 µm PS C18(769)이 1위, Biozen 2.6 µm Peptide XB-C18(757)이 바로 뒤였다. 원문은 두 컬럼의 코어셸 입자가 전다공성보다 효율·속도에서 유리해 분석 시간이 짧아지고 피크 모양이 좋아진다고 설명한다.
  • 같은 XB-C18 화학이라도 바이오이너트 하드웨어와 함께 쓰면 피크 용량이 약 7 % 늘었다(Kinetex 704 → Biozen 757).
  • 그림 12의 EEMTK·ADYEK: Kinetex PS C18에서 머무름 3.52·4.00분, 반높이 피크 폭 0.068·0.070. Kinetex C18에서는 6.54·7.00분, 0.120·0.130(피크 폭 단위는 원문에 없음).

염기성 펩타이드 — 피크 용량과 꼬리끌림

  • Kinetex PS C18(789)이 1위. 원문은 양전하를 띤 표면 개질이 산성뿐 아니라 염기성 펩타이드의 선택성과 피크 모양도 개선한다고 설명한다. Kinetex XB-C18, Biozen Peptide XB-C18, Kinetex F5도 염기성 펩타이드를 효율적으로 분리한 컬럼으로 꼽혔다.
  • PS 화학은 Biozen Peptide와 Kinetex 모두 염기성 펩타이드 분리가 좋았고, 코어셸인 Kinetex 쪽이 더 높았다 — 예: HYNPSLK·KHYNPSLK 분리도 Kinetex PS C18 12.57, Biozen Peptide PS C18 11.27(그림 14).
  • 염기성 펩타이드는 고정상과의 원치 않는 2차 상호작용으로 꼬리끌림이 흔하다. 원문은 비대칭도의 중앙값과 분포를 보면 PS C18이 꼬리끌림을 줄이는 데 분명히 유리하다고 결론짓는다. 평균값(표 6)은 Kinetex PS C18 · Luna Omega PS C18 1.05, Biozen Peptide PS C18 1.15였다.
  • 한 펩타이드(HYNPSLK)만 보면 결과가 갈린다(아래 그림): Kinetex는 PS C18 1.28 vs XB-C18 1.69, Luna Omega는 PS C18 1.01 vs C18 1.66으로 PS가 나았지만, Biozen Peptide는 PS C18 1.19 vs XB-C18 1.06으로 XB-C18이 더 대칭이었다.
염기성 펩타이드 HYNPSLK의 추출 이온 크로마토그램과 비대칭 계수 — Kinetex·Biozen Peptide·Luna Omega의 PS C18과 XB-C18/C18 비교(TN-1382 그림 15)
TN-1382 그림 15 — (A) Kinetex PS C18 · XB-C18, (B) Biozen Peptide PS C18 · XB-C18, (C) Luna Omega PS C18 · C18. 그림 속 표의 Biozen PS C18 입자경 표기(2.6 µm)는 시험 목록(3 µm)과 다릅니다. 출처: Phenomenex.

긴 펩타이드 (20 잔기 초과 또는 2000 Da 초과)

  • Biozen 2.6 µm Peptide XB-C18이 가장 높았고(668), 가장 낮은 것은 전다공성 Luna Omega 3 µm C18(447)이었다. 원문은 두 가지를 이유로 든다 — di-isobutyl 곁사슬이 입체 장애를 줄여 긴 펩타이드가 고정상과 더 잘 상호작용하고, 코어셸 입자가 분석물 확산을 줄여 피크가 좁아진다.
  • 전반적으로 코어셸이 전다공성보다 나았다. 예외는 Biozen 1.6 µm Peptide Polar C18(647)로, 원문은 작은 입자경이 분리능과 효율을 높였기 때문이라고 설명한다.
  • Biozen Peptide XB-C18이 Kinetex XB-C18(579)보다 뚜렷이 높아, 원문은 BioTi 하드웨어가 긴 펩타이드의 회수율과 재현성에 역할을 한다고 해석한다.
  • 가장 긴 두 펩타이드(51·58 잔기, 그림 17): Biozen Peptide XB-C18에서 머무름 52.49·53.24분, 피크 폭 0.25·0.26분. Luna Omega C18에서는 55.40·56.13분, 0.84·0.55분 — 머무름은 Luna Omega가 길고, 분리는 Biozen 쪽이 컸다.

탈아미드 — Asp·IsoAsp 이성질체

안정성 시험에서 흔히 만나는 복잡한 탈아미드 양상을 다 보려면 컬럼 선택이 중요합니다. 아스파르트산(Asp)과 아이소아스파르트산(IsoAsp) 이성질체가 함께 있으면 크로마토그래피 분리가 어려워집니다. 대상 펩타이드는 VVSVLTVLHQDWLNGK입니다.

  • Luna Omega 3 µm PS C18: 질량이 같은 탈아미드형(Asp·IsoAsp)을 주요 피크 3개로 완전히 분리했다. 원문은 양전하 표면의 이온 교환 상호작용이 탈아미드로 생긴 작은 산성도 차이를 구별할 만큼 충분하다고 해석한다.
  • Biozen 3 µm Peptide PS C18: 피크 4개를 중간 정도로 분리했다. 앞의 Asp·IsoAsp형에 더해, 앞서는 검출되지 않았던(원문 표현) 이중 탈아미드형이 나왔다. 원문은 BioTi 하드웨어가 이런 산성 펩타이드의 회수율을 높였을 가능성을 든다.
  • Kinetex 2.6 µm PS C18은 이 형태들을 하나도 나누지 못했고, Luna Omega 3 µm Polar C18도 분리하지 못했다.
  • 원문의 결론: 탈아미드형 분리는 양전하 표면 화학 + 전다공성 입자 조합에서 좋았다. 화학(Polar C18은 분리 실패)과 입자 구조(코어셸 vs 전다공성)를 함께 골라야 한다.
  • 확인은 EAD 조각화로 했다. EAD는 Asp·IsoAsp를 가르는 표지 조각을 만들며, IsoAsp에서는 −57 Da 이동한 조각 (z3+1−57)이 나온다.
VVSVLTVLHQDWLNGK 원형·탈아미드형의 추출 이온 크로마토그램 — Luna Omega PS C18, Biozen Peptide PS C18, Kinetex PS C18, Luna Omega Polar C18(TN-1382 그림 18)
TN-1382 그림 18 — 왼쪽 EIC, 오른쪽 확대. (A) Luna Omega 3 µm PS C18, (B) Biozen 3 µm Peptide PS C18, (C) Kinetex 2.6 µm PS C18, (D) Luna Omega 3 µm Polar C18. 출처: Phenomenex.

5. 상황별로 먼저 볼 컬럼

원문 결론은 펩타이드 혼합물에서 먼저 평가할 화학으로 XB-C18 · Polar C18 · PS C18 세 가지를 꼽습니다. 이 표는 그 결론과 위 결과를 출발점으로 정리한 것입니다. «근거»가 원문이면 TN-1382에 그 결과가 있다는 뜻이고, 원리면 일반 원리에서 나온 제안이라 직접 시험해야 한다는 뜻입니다.

이런 분석이라면먼저 볼 컬럼이유근거
처음 스크리닝 — 성질이 여러 가지인 펩타이드를 한 번에 볼 때Biozen 2.6 µm Peptide XB-C18다음 후보: Kinetex 2.6 µm XB-C18원문 결론은 XB-C18이 «대부분의 펩타이드 성질에서 균형 잡힌 성능»을 보였다고 적는다. NIST mAb 펩타이드에서 극성(718)·긴 펩타이드(668) 범주 1위, 산성 범주 2위(757)였다.원문
일찍 용출되는 극성 펩타이드, 당펩타이드(G0F·G2F 당형)Biozen 1.6 µm Peptide Polar C18다음 후보: Luna Omega 3 µm Polar C18 · Kinetex 2.6 µm Polar C18EEQYNSTYR의 G2F·G0F 당형 사이 분리도가 1.07로, 같은 계열 XB-C18·PS C18(각 0.44)보다 컸다. Luna Omega Polar C18은 친수성 펩타이드의 머무름과 초반 피크 모양이 Kinetex보다 좋았고, Kinetex Polar C18은 7종 혼합물에서 피크 용량이 가장 높았다(451).원문
산성·염기성 펩타이드, 염기성 펩타이드의 꼬리끌림Kinetex 2.6 µm PS C18다음 후보: Biozen 3 µm Peptide PS C18 · Luna Omega 3 µm PS C18산성(769)·염기성(789) 범주 모두 피크 용량 1위였다. 양전하를 띤 표면 개질이 산성·염기성 펩타이드의 선택성과 피크 모양을 개선한다고 원문은 설명한다. 염기성 펩타이드 평균 비대칭도 1.05.원문
탈아미드 이성질체(Asp·IsoAsp) 분리 — 안정성 시험Luna Omega 3 µm PS C18다음 후보: Biozen 3 µm Peptide PS C18VVSVLTVLHQDWLNGK의 탈아미드형(Asp·IsoAsp)을 주요 피크 3개로 나눴다. Biozen Peptide PS C18은 이중 탈아미드형까지 4개 피크를 보였다(분리는 중간 정도). Kinetex PS C18과 Luna Omega Polar C18은 나누지 못했다.원문
20 잔기가 넘는 긴 펩타이드Biozen 2.6 µm Peptide XB-C18긴 펩타이드 범주 피크 용량 1위(668)였다. 원문은 Luna Omega C18(447)과의 차이를 di-isobutyl 곁사슬의 입체 장애 감소와 코어셸 입자로, Kinetex XB-C18(579)과의 차이를 BioTi 하드웨어로 설명한다.원문
방향족 선택성(Biphenyl·Phenyl-Hexyl)을 써 보고 싶을 때Kinetex 2.6 µm Biphenyl다음 후보: Kinetex 2.6 µm F5이 시험(아세토나이트릴)에서는 페닐 계열 셋 가운데 Phenyl-Hexyl(357)·Biphenyl(360)의 피크 용량이 가장 낮았다(13종 전체에서는 Biozen Peptide PS C18 337 다음). 원문은 아세토나이트릴이 π-π 상호작용을 크게 방해하도록 일부러 골랐다고 적는다. 메탄올에서 π-π 선택성이 살아난다는 것은 일반 원리이고 이 자료로 확인된 것은 아니므로, 직접 시험해야 한다.원리

스크리닝 순서 (예)

  1. XB-C18로 전체를 본다. 바이오 시료라면 BioTi 하드웨어의 Biozen Peptide XB-C18부터.
  2. 초반 극성 펩타이드·당펩타이드가 약하면 → Polar C18(Biozen Peptide Polar C18 · Luna Omega Polar C18).
  3. 산성·염기성 펩타이드 모양이 나쁘거나 탈아미드형을 갈라야 하면 → PS C18. 피크 용량은 코어셸 Kinetex PS C18, 탈아미드 이성질체는 전다공성 Luna Omega·Biozen Peptide PS C18.
  4. 그래도 안 되는 펩타이드가 서열 커버리지·CQA에 필요하면 → 선택성이 다른 화학을 추가로 시험한다(여러 컬럼 결과를 합쳐 서열 커버리지를 채우는 것은 일반 원리). 원문은 이런 선택성 차이가 머무름이 낮거나 피크 모양이 나쁜 문제 펩타이드에 특히 유용하다고 적는다.

일반 원리: PS C18은 양전하 표면이라 염기성 펩타이드와 반발할 수 있습니다 — 이 자료에서도 매우 친수성인 염기성 펩타이드(RASG-1)가 PS C18 세 컬럼에서 일찍, 넓게 용출됐습니다.

6. 원문 표기에서 확인이 필요한 부분

원문 안에서 서로 맞지 않는 표기를 모았습니다. 이 페이지는 원문 값을 고치지 않고 위 본문에서 필요한 곳에만 단서를 달았습니다.

  • LC 조건의 유속이 «0.200 µL/min»(혼합물)·«0.300 µL/min»(NIST mAb)으로 적혀 있습니다. 내경 2.1 mm 컬럼이라 mL/min의 오기로 보이지만 원문 표기를 그대로 옮겼습니다.
  • 시험 컬럼 목록에서 Biozen 3 µm Peptide PS C18의 품번이 Biozen 2.6 µm Peptide XB-C18과 같은 00F-4768-AN으로 적혀 있습니다. 이 페이지에는 PS C18 품번을 싣지 않았습니다.
  • 시험 컬럼 목록은 Biozen 1.6 µm Peptide Polar C18(150 × 2.1 mm)의 품번을 00F-4782-E0으로 적었지만, Phenomenex 제품 페이지에서 00F-4782-E0은 3 µm, 150 × 4.6 mm 제품입니다. 이 페이지에는 이 품번도 싣지 않았습니다.
  • 입자경 표기가 시험 목록과 다른 곳이 있습니다 — 그림 8 «Kinetex 3 µm Polar C18», 그림 9 «Luna Omega 1.6 µm Polar C18», 그림 14·15 표 «Biozen Peptide 2.6 µm PS C18». 시험 목록은 Kinetex 2.6 µm, Luna Omega 3 µm, Biozen Peptide PS C18 3 µm입니다.
  • 표 6의 머리글은 «TF (Ave), Acidic Peptides»인데, 표 설명과 본문은 염기성 펩타이드의 비대칭도라고 적습니다.
  • 그림 11·13 설명은 «Kinetex family»라고 적었지만 막대는 13종 전부입니다. 그림 17 설명도 «Kinetex family»라고 적었지만 실제 비교는 Biozen Peptide XB-C18와 Luna Omega C18입니다.
  • 그림 12 표의 분리도(2.17·2.09)와 그림 17 표의 분리도(108.29·5.06)는 같은 표의 머무름 시간과 피크 폭으로 다시 계산되지 않아 싣지 않았습니다. 그림 10·14의 분리도는 다시 계산하면 표 값과 맞습니다.
  • 산성 펩타이드 본문은 Kinetex PS C18과 XB-C18을 비교한다고 적었지만, 그림 12와 그 표는 Kinetex PS C18과 Kinetex C18입니다.
  • Biozen 1.6 µm Peptide Polar C18에서 본문은 G2F·G0F 당형이 «기준선 분리»됐다고 적었지만, 그림 10 표의 분리도는 1.07입니다.
  • 본문은 그림 15의 대상이 KHYNPSLK라고 적었지만 그림은 HYNPSLK입니다. 그림 번호 14가 두 번 쓰였고, 본문은 그림 19–22를 가리키지만 그림은 21번까지 있습니다.
  • 표 2에서 LC 29-38의 길이 칸이 «C»로 적혀 있고, 극성 범주 정의(극성 비하전 잔기 35 % 이상)와 달리 표 3에 29 %·25 % 펩타이드가, 산성 범주 정의(29 % 이상)와 달리 표 4에 26 %·25 % 펩타이드가 들어 있습니다.

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