분석조건 (1)
LC기울기 용리9.13FD-우루시올-x1원문 표제 단서: 액체크로마토그래프
- 칼럼
- C18 · USP L1
C18계 컬럼
안지름 2 mm · 길이 15 cm · 입자경 5 μm
- 칼럼온도
- 40°C
- 이동상
- 0.1%(v/v) 포름산(formic acid) 함유한 수용액
- 메탄올
- 유량
- 0.25 mL/분
- 주입량
- 10 μL
- 기타표
검량선 농도,혼합표준용액 농도,첨가 부피 10 ng/mL,100 ng/mL,0.2 mL (된장의 경우 0.1mL) 20 ng/mL,200 ng/mL 30 ng/mL,300 ng/mL 40 ng/mL,400 ng/mL 50 ng/mL,500 ng/mL - 정량한계
- 5) 정량한계는 우루시올Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ, 라콜 각각에 대하여 10 μg/kg을 적용한다.
질량분석(MS) 조건 보기 (8항목)
- 이온화 방법
- 가) 이온화 방법: ESI(Negative ion mode)
- Ion source temperature
- 나) Ion source temperature: 350℃
- Ion spray voltage
- 다) Ion spray voltage: -4.5 kV
- Curtain gas
- 라) Curtain gas: 6 psi
- Collision gas(N2)
- 마) Collision gas(N2): 10 psi
- Ion source gas 1
- 바) Ion source gas 1: 10 psi
- Ion source gas 2
- 사) Ion source gas 2: 20 psi
- 전이표
연번 성분명 (Compound) 머무름시간 (분) 분자량 (g/mol) 선구이온 (Precursor ion,m/z) 생성이온 (Product ion,m/z) 충돌에너지 (Collision Energy, eV) 1 Urushiol Ⅰ 8.98 320.5 319.1 122.21) 136.1 -48 -46 2 Urushiol Ⅱ 8.41 318.5 317.1 122.01) 135.0 -42 -56 3 Urushiol Ⅲ 8.00 316.5 315.3 122.01) 135.2 -44 -50 4 Urushiol Ⅴ 7.65 314.5 313.3 135.11) 122.0 -48 -44 5 Laccol 9.82 348.6 347.4 121.91) 135.0 -52 -60 1) 정량이온
기울기 조건표
| 시간(분) | 이동상A(%) | 이동상B(%) |
|---|---|---|
| 0.0 | 20 | 80 |
| 1.0 | 20 | 80 |
| 3.0 | 0 | 100 |
| 10.0 | 0 | 100 |
| 10.5 | 20 | 80 |
| 15 | 20 | 80 |
이 조건으로 Core-Shell 전환 계산하기
이 조건의 칼럼 사양·유량이 크로마톡 계산기에 채워진 채로 열립니다.
고시 원문 보기 (축자)
가) 컬럼: C18계 컬럼 (2.0 mm × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것 나) 이동상 (1) 이동상 A: 0.1%(v/v) 포름산(formic acid) 함유한 수용액 (2) 이동상 B: 메탄올 [표 1] 다) 이동상 유량: 0.25 mL/분 라) 컬럼 온도 40°C 마) 주입량: 10 μL 2) 질량분석기 분석조건 가) 이온화 방법: ESI(Negative ion mode) 나) Ion source temperature: 350℃ 다) Ion spray voltage: -4.5 kV 라) Curtain gas: 6 psi 마) Collision gas(N2): 10 psi 바) Ion source gas 1: 10 psi 사) Ion source gas 2: 20 psi 표2. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온 [표 2] ※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함 3) 검량선 작성 우루시올의 특성(산화반응에 따른 폴리머 형성 등)을 고려하여 다음의 Matrix- matched standard(MMS) 조제법에 따라 처리한 혼합표준용액을 농도별로 취하여 액체크로마토그래프-질량분석기에 주입한다. 얻어진 크로마토그램 상의 정량이온의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선(Matrix-matched calibration curve)을 작성한다. 가) Matrix-matched standard(MMS) 조제법 음성검체(Blank sample) 2 g(된장의 경우 1 g)을 정밀히 달아 50 mL 원심분리관에 취하고 추출용액 5 mL를 가한 후 교반기(vortex mixer)로 1분간 혼합한다. 아세토니트릴 5 mL와 염화나트륨 1 g을 첨가하고, 교반기로 1분간 추출한 다음, 4℃, 2,700 ×g에서 10분간 원심분리한다. 15 mL 원심분리관에 정제용 시약(dSPE 카트리지) 50 mg(액상검체) 또는 350 mg(고상검체)을 취하고 분리된 상층액 전량을 넣는다. 교반기로 1분간 혼합하고, 4℃, 2,700 ×g에서 10분간 원심분리한 뒤, 상층액 전량을 새로운 15 mL 원심분리관에 옮긴다. 각 검량선 농도[표 3]에 맞는 혼합표준용액 0.2 mL(된장의 경우 0.1mL)을 가하고, 40°C 수용액상에서 질소건고한다. 메탄올 1 mL을 가하고 교반기로 1분간 혼합한 후 5분간 초음파 처리하여 용해시킨다. 이 액을 4℃, 13,500 ×g에서 3분간 원심분리한 후, 상층액을 최종 표준용액으로 한다. 표3. Matrix-matched standard 조제에 사용한 표준용액 농도 및 부피 [표 3] 4) 표준품의 크로마토그램 그림 1. 표준품의 크로마토그램 예시. 5) 정량한계는 우루시올Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ, 라콜 각각에 대하여 10 μg/kg을 적용한다.
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상 분류 C18USP L1 상당
약전 일반명 '액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔'(USP 분류로는 L1 상당)에 해당. 약전은 브랜드를 지정하지 않으므로 각조가 기재한 물리 사양(치수·입자경 등)과 KP 통칙·일반시험법의 조정 허용범위 안에서 해당 상을 충족하는 C18을 선택할 수 있다 — 선택 기준은 시스템적합성(분리도·테일링·RSD) 통과 용이성과 재현성이다.