소마트로핀 농축액 (유전자재조합)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 214 nm)
칼 럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레
스강관에 5 ~ 10 μm의 액체크로마토그래프용 옥틸실
릴실리카겔을 충전한다.
칼럼온도 : 30 ℃ 부근의 일정온도
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음 표와 같이
농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 트리플루오로아세트산·물혼합액 (999 : 1)
이동상 B - 아세토니트릴·물·트리플루오로아세트산
혼합액 (899 : 100 : 1)
이동상 A     이동상 B
시간 (분)                           유출조건
(vol%)    (vol%)
0 ~ 20    100 → 80   0 → 20    선형 농도기울기
20 ~ 40    80 → 75   20 → 25   선형 농도기울기
40 ~ 65    75 → 50   25 → 50   선형 농도기울기
65 ~ 70    50 → 20   50 → 80   선형 농도기울기
유 량 : 1 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 154 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 220 nm)
칼 럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레
스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 부틸실릴실리
카겔을 충전한다.
칼럼온도 : 45 ℃ 부근의 일정온도
이동상 : 0.05 mol/L 트리스-염산 완충액 (pH 7.5)·프
로판올혼합액 (71 : 29)
칼럼 평형화 : 50 % 아세토니트릴 용액에 0.1 % 트리플
루오로아세트산이 혼합된 용액 200 ~ 500 mL을 이용
하여 칼럼을 평형화한다. 필요 시 칼럼의 성능을 개선하
기 위하여 평형화 과정을 반복한다.
유 량 : 0.5 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 154 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 214 nm)
칼 럼 : 안지름 약 7.8 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레
스강관에 액체크로마토그래프용 친수성실리카겔이 충전
된 칼럼으로서 분자량 5000 ~ 150000 의 단백질을 분
리할 수 있는 칼럼
이동상 : 0.063 mol/L 인산염완충액 (pH 7.0)·2-프로
판올혼합액 (97 : 3)
유 량 : 0.6 mL/분

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 154 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 200 nm)
모세관 : 안지름 약 50 μm, 유효길이 약 70 cm의 코
팅되지 않은 실리카
모세관온도 : 30 ℃ 부근의 일정온도
단계            용액           시간     조건
1 mol/L 수산화나트륨      20 분
압력
모세관
물           10 분   또는
평형화
진공
모세관 전기영동 완충액        20 분
0.1 mol/L 수산화나트륨    2 분    압력
분석 간
또는
세척     모세관 전기영동 완충액        6 분    진공
검액 및 표준액 주입        3 초    압력
주입                                또는
모세관 전기영동 완충액        1 초
진공
217
분리     모세관 전기영동 완충액        80 분
V/cm

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 155 쪽)

pH 4.0 ~ 6.5 범위의 폴리아크릴아미드겔을 이용하여
등전집속시험을 한다. 검액과 표준액 15 μL씩을 가지
고 겔에 점적한다. 양극액으로 인산용액 (50 g/L
H3PO4)에 글루탐산이 14.7 g/L로 용해된 액을 사용하
고, 음극액으로 89.1 g/L β-알라닌 용액을 사용한다.
2000 V, 25 mA에서 등전집속을 하며, 2.5 시간 동안
전압이 일정하게 유지하여 초점화가 일어나게 하며, 전
력은 25 W를 넘지 않도록 한다. 집속이 끝난 다음 115
g/L의 트리클로로아세트산용액과 34.5 g/L의 설포살리
실산시액을 포함하는 적당한 양의 용액에 겔을 30 분간
담근 다음 겔을 물·에탄올(99.5)·아세트산(100)혼
합액 (67 : 25 : 8)에 옮겨 5 분간 잠기도록 담가둔다.
겔은 물·에탄올(99.5)·아세트산(100)혼합액 (67 :
25 : 8) 1 L에 쿠마시브릴리안트 블루 R-250 1.15 g
을 넣어 녹여 미리 60 ℃로 가온해 둔 염색용액에 10
분간 담가 염색한다. 염색이 끝난 다음 과량의 염색 시
약이    제거될     때까지     물·에탄올(99.5)·아세트산
(100)혼합액 (67 : 25 : 8)으로 탈색한다.
검액 (a)에서 얻은 주밴드 이외에 나타나는 밴드는 검
액 (b)의 주밴드보다 진하지 않다 (5 % 이하).

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 155 쪽)