비타민E

(1) 칼럼：순상형 칼럼
(2) 이동상：헥산․ 이소프로판올(98：2)
(3) 유속：0.5 mL/분
(4) 검출기：형광검출기(여기파장 298 nm, 측정파장 325 nm)
5) 정량시험
시험용액 1.0 mL에 토콜(tocol)표준용액 1.0 mL를 가해(S) 이의 10 μL를 고속액체크로마
토그래프용 칼럼에 주입하여 얻은 토코페롤 동족체의 피크 넓이 또는 높이(Pt o c ) 및 토콜
(tocol)의 피크 넓이 또는 높이(Pi n t )를 구한다. 또한 토코페롤 동족체 각각에 대하여 각 토
코페롤 표준용액 1.0 mL를 취해 이에 토콜(tocol)표준용액 1.0 mL를 가해 이의 10 μL를
액체크로마토그래프에 주입하여 얻은 각 토코페롤 동족체의 피크 넓이 또는 높이(Ps t - t o c )
와 토콜(tocol)의 피크 넓이 또는 높이 (Ps t - t o c )를 구하고, 이들의 중량(mg)에서 토코페롤
동족체의 토콜(tocol)에 대한 환산계수(F)를 구한다. 검체중 토코페롤 동족체의 함량
(mg/100 g)은 다음 계산식에서 구한다.
가) 계산방법
(1) 일반시료 및 축산물의 경우(버터등 유지류를 제외한다)
Pt o c           100
토코페롤동족체의 양(mg/ 100 g) ＝ S ×            × F ×
Pi n t           W
S：시험용액에 함유된 토콜(tocol)의 함량(mg)
S ＝ V × C
V：검체에 첨가한 토콜(tocol)표준용액의 양(mL)
C：검체에 첨가한 토콜(tocol)표준용액의 농도(mg/mL)
Pt o c ：시험용액중 토코페롤동족체 피크의 넓이 또는 높이
Pi n t ：시험용액중 토콜(tocol) 피크의 넓이 또는 높이
F    ：환산계수
C              Ps t - i n t
Fα- δ ＝ s t - t o×c
Cs t - i n t   Ps t - t o c
Cs t - t o c ：표준용액중 토코페롤 동족체의 농도
Ps t - t o c ：표준용액중 토코페롤동족체 피크의 높이 또는 넓이
Cs t - i n t ：표준용액중 토콜(tocol)의 농도
Ps t - i n t ：표준용액중 토콜(tocol) 피크의 높이 또는 넓이
W : 검사시료채취량(g)
(2) 버터 등 유지류의 경우
50         Pt o c           100
토코페롤 동족체의 양(mg/ 100 g) ＝ S ×                    ×            × F ×
D         Pi n t           W

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- 칼럼 : C8 (4.6×150 mm, 5 μm) 또는 C1 8 (3.9×150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것
- 칼럼온도 : 30℃
- 이동상 : 95% 메탄올
- 유    속 : 1.0 mL/min
- 검출파장 : UV 298 nm
- 주입량 : 10 μL
나) 정량시험
표준용액과 시험용액을 각각 주입하고 피크의 머무름 시간을 비교하여 동일 물질인
지 정성 확인 후 표준용액의 피크면적 또는 높이에 의해 구한 검량선을 사용하여
시험용액 중의 비타민E의 농도(㎍/mL)를 구하고, 검사시료 중 비타민E의 함량
(mg/100 g)을 산출한다.
비타민E 함량(mg/100 g) = C × V/S ×
100
1000
C : 검량선에서 구한 α, β, γ, δ- 토코페롤 합의 농도 (㎍/mL)
V : 시험용액의 최종부피 (mL)
S : 시료 채취량 (g)
100 : 단위환산
1000

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