에리스로포이에틴 농축액 (유전자재조합)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 214 nm)
모세관 : 안지름 약 50 μm, 유효길이 약 100 cm의 코
팅을 하지 않은 실리카
모세관온도 : 35 ℃ 부근의 일정온도
검액 및 표준액은 분석하는 동안 4 ℃를 유지한다.
농축 모세관 전기영동 완충액 : 염화나트륨 0.584 g, 트
리신 1.792 g, 아세트산나트륨무수물 0.820 g에 물을 넣
어 100 mL로 한다.
1 mol/L 푸트레신 용액 : 푸트레신 0.882 g에 물을 넣어
10 mL로 한다.
모세관 전기영동 완충액 : 요소 21.0 g을 물 25 mL에
넣어 30 ℃에서 녹인다. 농축 모세관 전기영동 완충액 5
mL와 1 mol/L 푸트레신 용액 125 μL를 넣고 물을 넣
어 50 mL로 한다. 묽은 아세트산을 이용하여 30 ℃에서
pH 5.55 로 적정하고 멤브레인필터 (공경 0.45 μm)를
써서 여과한다.
시간
단계           용액                 조건
(분)
0.1 mol/L 수산화나트륨 용액 60     압력
모세관
모세관 전기영동 완충액        60    압력
평형화
모세관 전기영동 완충액        720   20 kV
물            10    압력
분석 간
0.1 mol/L 수산화나트륨 용액 5       압력
세척
모세관 전기영동 완충액     10      압력
압력 혹은
주입     검액 및 표준액 주입        -
진공
143 V/cm
분리    모세관 전기영동 완충액        80
(15.4 kV)

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 158 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 214 nm)
칼 럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레
스강관에 5 ~ 10 μm의 액체크로마토그래프용 말단 차
단된 부틸실릴실리카겔을 충전한다.
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단
계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 물‧트리플루오로아세트산혼합액 (999.4 :
0.6)
이동상 B - 아세토니트릴‧물‧트리플루오로아세트산혼합액
(899.4 : 100 : 0.6)
시 간         유 량 이동상 A         이동상 B
유출조건
(분)       (mL/분) (vol%)      (vol%)
0 ~ 10      0.75   100           0   일정 농도
선형
10 ~ 125     0.75   100 → 39 0 → 61
농도기울기
선형
125 ~ 135    1.25    39 → 17 61 → 83
농도기울기
선형
135 ~ 145    1.25     17 → 0 83 → 100
농도기울기
145 ~ 150    1.25       100     0     일정 농도
칼럼 평형화: 이동상 A를 15분 이상 흘려 평형상태에 도
달하게 한다.

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 160 쪽)

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 214 nm)
칼 럼 : 안지름 약 7.5 mm, 길이 약 60 cm인 스테인레
스강관에 분자량 범위가 20000 ~ 200000인 구형 단백
질의 분획에 적합한 액체크로마토그래프용 친수성실리카
겔을 충전한다.
이동상 : 인산일수소나트륨무수물 1.15 g, 인산이수소칼
륨 0.2 g, 염화나트륨 23.4 g을 물 1000 mL로 한다. 필
요시 pH 7.4로 적정한다.
유 량 : 0.5 mL/분
측정시간 : 에리스로포이에틴 단량체 유지시간의 2배

고시 원문의 표기·오탈자·조판 잔재를 고치지 않고 그대로 옮겼습니다. (원문 160 쪽)