단백질 침전 + 인지질 동시 제거 솔루션
Phree는 생체 시료(혈장, 혈청) 분석 시 단백질 제거(Protein Removal), 인지질 제거(Phospholipid Elimination), 그리고 메소드 개발 불필요(No Method Development)라는 3가지 이점을 동시에 제공하는 전처리 제품입니다.
Solvent Shielding Technology를 적용하여 유기 용매의 드리핑(Dripping)을 방지하고, Phree 내부에서 단백질 침전(Protein Precipitation)이 이루어집니다. 별도의 메소드 개발 없이 튜브와 96-Well 플레이트 모두 동일한 방법으로 사용할 수 있습니다.
2. 핵심 성능 및 이점 (Key Performance)
LC-MS/MS 분석에서 인지질에 의한 이온 억제 문제를 해결하는 구체적인 데이터입니다.
Solvent Shielding Technology
유기 용매의 드리핑을 방지하여 Phree 내부에서 단백질 침전이 완료됩니다. 별도 침전 단계가 필요 없습니다.
인지질 98% 이상 감소
기존 단백질 침전 대비 인지질 피크 면적이 >98% 감소합니다 (WIL Research 평가 데이터 기준).
확장된 인지질 용량
최대 400 µL 혈장까지 유의미한 파과(Breakthrough) 없이 인지질을 제거할 수 있습니다.
One Method for All
튜브와 96-Well 플레이트 모두 동일한 프로토콜을 사용합니다. 별도의 메소드 개발이 필요 없습니다.
3. 기술 사양 (Technical Specifications)
Phree 제품 포맷, 용량, 용매 조건 및 주문 정보입니다.
제품 포맷 및 주문 정보
| Part Number | 제품 설명 | 포장 단위 |
|---|---|---|
| 8B-S133-TAK | Phree 1 mL Tube | 100/box |
| 8E-S133-TGB | Phree 96-Well Plates | 2/box |
시료 및 용매 조건
| 항목 | 조건 |
|---|---|
| 혈장 로딩량 (96-Well Plate) | 25 - 400 µL |
| 혈장 로딩량 (Tube) | 25 - 200 µL |
| 유기 용매 옵션 1 | Acetonitrile + 1% Formic acid (300 µL) |
| 유기 용매 옵션 2 | Methanol + 1% Formic acid (400 µL) |
| 여과 방법 | 원심분리 / 진공 / 양압(Positive Pressure) |
LC-MS/MS 분석 조건 (App ID 20011)
| 항목 | 조건 |
|---|---|
| 컬럼 | Kinetex 2.6 µm C18 100 A, 50 x 2.1 mm (Part No. 00B-4462-AN) |
| 이동상 A | 0.1% Formic acid in Water |
| 이동상 B | 0.1% Formic acid in Methanol |
| 그래디언트 | 0 min / 60% B, 0.5 / 95, 15.5 / 95, 15.51 / 60, 19.5 / 60 |
| 유속 | 400 µL/min |
| 온도 | 22 °C |
| 검출 | MS @ 425 °C; 184 amu |
4. 성능 비교 데이터 (Performance Comparison)
인지질 제거 성능과 컬럼 수명 보호 효과에 대한 실험 데이터입니다.
인지질 프로파일 비교
기존 단백질 침전(Protein Precipitated Plasma) 대비 Phree 처리 시료에서 약 50배 줌 차이의 인지질 프로파일을 보입니다.
Lysophosphatidylcholines와 Phosphatidylcholines 등 모든 클래스의 인지질을 제거합니다.
경쟁 제품 대비 성능
Agilent Captiva NDLipids 및 Supelco HybridSPE 대비 약 25배 낮은 인지질 잔류량을 나타냅니다.
Waters Ostro 대비 약 40배 낮은 인지질 수준으로 보다 효과적인 제거를 제공합니다.
컬럼 수명 보호
Phree로 전처리한 시료는 약 5,000 µL 혈장 주입 후에도 유의미한 감도 손실 없이 분석이 가능합니다.
250회 주입 테스트에서 Phree 처리 시료는 감도를 유지한 반면, 기존 단백질 침전 시료는 즉각적인 감도 손실을 보였습니다.
회수율 (Recovery)
산성 화합물: Diclofenac, Naproxen - 높은 회수율
염기성 화합물: Amitriptyline, Metoprolol - 높은 회수율
중성 화합물: Acetaminophen, Prednisone - 높은 회수율
5. 주요 응용 분야 (Applications)
생물학적 분석 (Bioanalysis)
혈장 및 혈청 시료의 LC-MS/MS 분석 전처리. 인지질에 의한 이온 억제(Ion Suppression) 문제를 근본적으로 해결합니다.
임상 연구 (Clinical Research)
임상 시료의 약물 농도 정량 분석. 높은 회수율과 재현성으로 신뢰성 있는 데이터를 제공합니다.
약동학 (Pharmacokinetics)
PK 연구에서의 시료 전처리. 컬럼 수명을 보호하여 대량 시료 분석 시에도 안정적인 감도를 유지합니다.
6. 사용 프로토콜 (Protocol)
간단한 4단계로 단백질 침전과 인지질 제거를 동시에 수행합니다.
혈장 분주 (Dispense)
Phree에 혈장 시료를 분주합니다 (25 - 400 µL).
유기 용매 추가 (Add Solvent)
ACN + 1% FA (300 µL) 또는 MeOH + 1% FA (400 µL)를 추가합니다.
혼합 (Mix)
시료와 유기 용매를 혼합하여 단백질을 침전시킵니다.
여과 (Filter)
원심분리, 진공, 또는 양압으로 여과하여 정제된 시료를 수집합니다.
7. 전문가 팁 (Expert Tips)
Tip 1.용매 선택 가이드
Acetonitrile(ACN)은 300 µL로 사용하며, 일반적인 소분자 약물 분석에 적합합니다. Methanol(MeOH)은 400 µL로 사용하며, 극성이 높은 화합물 분석 시 유리할 수 있습니다. 두 용매 모두 1% Formic acid를 첨가하여 사용합니다.
Tip 2.혈장 용량 최적화
96-Well 플레이트에서는 최대 400 µL, 튜브에서는 최대 200 µL까지 로딩할 수 있습니다. 인지질 용량 테스트 결과, 400 µL까지 유의미한 파과 없이 안정적인 인지질 제거가 확인되었습니다. 분석 감도가 충분하다면 소량의 혈장(25-100 µL)으로도 사용 가능합니다.
Tip 3.컬럼 수명 보호 효과
Phree 처리 시료로 약 5,000 µL 혈장을 주입해도 감도 손실이 거의 없으며, 250회 연속 주입 테스트에서도 안정적인 성능을 유지합니다. 기존 단백질 침전만 수행한 시료는 초기 주입부터 감도가 저하되므로, 인지질 제거는 LC-MS/MS 분석의 필수 전처리 단계입니다.