Arginine as a Mobile Phase Co-solvent to Improve High Molecular Weight Aggregate Recovery for Size Exclusion Chromatography.PDF

분야: 바이오제약

소개

본 문서는 아르기닌을 이동상 공용매체로 사용하여 크고 분자량이 높은 집합물의 회수를 향상시키는 크기 배제 크로마토그래피(SEC) 기술에 대해 설명합니다. 특히, NIST mAb에서 아르기닌 농도를 조절함으로써 집합물 회수율을 개선하는 방법을 탐구하였습니다.

실험 조건 (Experimental Conditions)

• 컬럼: bioZen™ 1.8 µm dSEC-2, 200 Å
• Part No.: 00H-4787-E0
• Dimensions: 300 x 4.6 mm
• 이동상: 200 mM Potassium Phosphate, 아르기닌 농도는 각각 100 mM, 200 mM, 및 250 mM로 조사됨 (pH 6.2)
• 유속: 0.35 mL/min
• 검출기 설정: UV @ 280 nm
• 온도: 25 °C
• Sample: NIST mAb (30 µg)

핵심 기술 요소

• 아르기닌은 크고 분자량이 높은 집합물의 회수를 향상시키는 유용한 공용매체로 사용될 수 있습니다.
• 100 mM 아르기닌에서 NIST mAb의 집합물 회수율은 80,851 mAU였으며, 이는 200 mM (96,818 mAU) 및 250 mM (97,146 mAU)보다 현저히 낮았습니다.
• 고분자량(HMW) 집합물의 백색 면적 비율은 각각 2.16%, 2.56%, 그리고 2.58%로 나타났으며, 이는 아르기닌 농도가 증가함에 따라 향상되었습니다.

응용 분야

• 바이오제약 산업에서 크고 분자량이 높은 집합물의 정확한 측정 및 회수를 위한 SEC 기술 개선.
• 아르기닌을 사용하여 단백질 재접착 과정에서의 효율성 향상.

결론 및 권장사항

아르기닌은 크고 분자량이 높은 집합물의 회수를 향상시키는 유용한 공용매체로, 특히 단일클론 항체에 대해 효과적입니다. 실험 결과 200 mM와 250 mM 아르기닌에서 가장 우수한 분리능과 회수율을 보였으며, 이러한 조건은 향후 SEC 응용 연구에서도 고려되어야 할 것입니다.

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