자성비드 면역포획 솔루션
Biozen MagBeads는 단백질과 펩타이드를 분리 및 정제하기 위한 균일한 1 µm 자성비드(Magnetic Bead) 입자입니다. Iron oxide 상자성 나노입자와 폴리머 코어 위에 Streptavidin이 코팅되어 있으며, 친수성 공중합체(Hydrophilic Copolymer)로 블로킹되고 비오틴화 BSA(Biotinylated BSA)와 결합되어 있습니다.
이 구조는 포획 항체(Capture Antibody)를 정확한 배향으로 결합시키고, 표면 밀집과 비특이적 결합에 의한 리간드 비활성화를 방지하며, 입자 분산성과 결합 효율을 향상시킵니다.
2. 핵심 성능 및 이점 (Key Performance)
비포화(Non-saturated) 표면 배향으로 정확한 항체 결합과 높은 회수율을 제공합니다.
정확한 결합 배향
비오틴화 BSA와 결합하여 포획 항체가 올바른 배향(Orientation)으로 위치합니다. 비포화 표면으로 정확한 결합을 보장합니다.
비특이적 결합 차단
친수성 공중합체로 블로킹되어 표면 밀집(Surface Crowding)과 비특이적 결합에 의한 리간드 비활성화를 방지합니다.
향상된 분산성
친수성 공중합체 코팅이 입자의 분산성(Dispersion)을 향상시켜 균일한 반응과 재현성 높은 결과를 제공합니다.
Dynabeads 대비 우수
Dynabeads M-280 대비 향상된 회수율과 더 높은 정확도의 펩타이드 정량 결과를 제공합니다 (App ID 25577).
3. 기술 사양 (Technical Specifications)
MagBead 스펙, 워크플로우, LC-MS 비교 분석 조건 및 주문 정보입니다.
MagBead 제품 사양
| 항목 | 사양 |
|---|---|
| Bead Type | Iron coated |
| Bead Diameter | 1 µm |
| Outside Coating Type | Streptavidin |
| Biotin Binding Capacity | > 200 pmol Biotin/mg |
| Coating Specification | Tosyl-Activated, blocked with hydrophilic copolymer |
| Concentration | 20 mg/mL |
| Available Formats | 25 mg, 50 mg, 500 mg |
워크플로우 (Workflow)
Step 1. MagBead Activation
Biotinylated Antibody + Pre-treated MagBeads
Mix and Incubate
Discard liquid (Magnetic Stand)
Step 2. Immunocapture
Activated MagBeads + Sample
Mix and Incubate
Discard liquid
Magnetic Stand
Add Elution Solvent
Transfer Supernatant
For Analysis
LC-MS 비교 분석 조건 (App ID 25577)
| 항목 | 조건 |
|---|---|
| 컬럼 | Biozen 3 µm Peptide PS-C18, 50 x 2.1 mm (Part No. 00B-4771-AN) |
| 이동상 A | 0.1% Formic acid in Water |
| 이동상 B | 0.1% Formic acid in Acetonitrile |
| 그래디언트 | 3-50% B in 4.5 minutes |
| 유속 | 0.3 mL/min |
| 온도 | 40 °C |
| 검출 | SCIEX X500B Q-TOF |
| 시료 | Rituximab 1.5 µg/mL (ASGYTFTSYNMHWVK) |
주문 정보 (Part Numbers)
| Part Number | 용량 | 농도 | Bead 크기 | 처리 가능 시료 수 |
|---|---|---|---|---|
| KS0-9531 | 25 mg | 20 mg/mL | 1.0 µm | 약 50 samples |
| KS0-9532 | 50 mg | 20 mg/mL | 1.0 µm | 약 100 samples |
| KS0-9533 | 500 mg | 20 mg/mL | 1.0 µm | 약 1000 samples |
4. 주요 응용 분야 (Applications)
PK/TK 연구
약동학(Pharmacokinetics) 및 독성동태학(Toxicokinetics) 연구에서 생체 시료 내 치료 항체를 면역포획하여 정량 분석합니다. 높은 회수율로 정확한 농도 측정이 가능합니다.
바이오마커 정량
복잡한 생체 매트릭스에서 저농도 바이오마커 펩타이드를 선택적으로 포획하여 LC-MS/MS 기반 정량 분석의 감도와 특이성을 향상시킵니다.
ADC 분석
항체-약물 접합체(ADC) 시료의 면역포획 및 정제에 활용됩니다. ADC 분석에 대한 상세 정보는 관련 기술 자료를 참고하세요.
Enhertu ADC 정량 분석 사례 보기하이브리드 LC-MS 생체분석
Phenomenex가 CRO KCAS Bio와 함께 낸 사례 연구(CS-1006). 자기 비드 친화 포획(첫째 선택성)과 LC-MS(둘째 선택성)를 묶는 하이브리드 LC-MS 생체분석을 CRO 실무자의 발언과 워크플로우 설명으로 소개하며, 정량 데이터는 싣지 않았습니다.
자기 비드 하이브리드 LC-MS 생체분석 - KCAS Bio 사례 연구 보기5. 전문가 팁 (Expert Tips)
Tip 1.Activation 프로토콜
MagBead 활성화 시 비오틴화 항체(Biotinylated Antibody)와 사전 처리된 MagBeads를 혼합한 후 충분히 인큐베이션합니다. Streptavidin-Biotin 결합이 완료되면 Magnetic Stand를 사용하여 비드를 고정시킨 후 상층액을 제거합니다. 인큐베이션 시간과 온도는 항체 종류에 따라 최적화가 필요합니다.
Tip 2.Magnetic Stand 사용법
Magnetic Stand에 튜브를 올린 후 비드가 완전히 벽면에 모일 때까지 약 1-2분간 대기합니다. 상층액을 제거할 때는 피펫 팁이 비드 펠릿을 건드리지 않도록 주의하며, 반대쪽 벽면을 따라 천천히 흡입합니다. Washing 단계에서도 동일한 방법을 적용합니다.
Tip 3.Elution 최적화
용출(Elution) 단계에서는 산성 조건(원본 TN-0136: 0.1% TFA, pH<3)을 사용하여 항원-항체 결합을 해리시킵니다. 용출 용매의 pH, 유기 용매 비율, 인큐베이션 시간을 조절하여 회수율을 최적화할 수 있습니다. 용출 후 즉시 중화(Neutralization)하여 분석물의 안정성을 유지하는 것이 좋습니다.
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