Utilizing Biozen™ Native RP-5 Column for Rapid RPLCHRMS Separation and Identification of Native, Intact Antibody Drug Conjugate Species.PDF

분야: 시료전처리

소개

항체-약물 콘jugate (ADCs)는 암 치료에 매우 효과적인 제형으로, 약물의 효능을 극대화하면서 체내 전반적인 노출과 부작용을 최소화한다. Padcev®와 Polivy® 등은 각각 방광암과 대세포 림프종 치료에 사용되는 승인된 ADC들이다. 상업적 ADC의 주요 품질 속성 중 하나는 평균 약물-항체 비율(DAR)로, 이를 결정하는 것은 중요한 과정이다.

실험 조건 (Experimental Conditions)

• 컬럼: bioZen Native-RP-5
  • 차원: 50 x 2.1 mm
  • 부품 번호: 00B-4800-AN
• 이동상:
  • A: 물 중 50 mM 아미노늄 아세테이트
  • B: 이소프로필 알코올/물 중 50 mM 아미노늄 아세테이트 (50/50, v/v)
• 유속: 0.2 mL/min
• 주입량: 20 µg ADC on-컬럼
• 온도: 25 °C
• HPLC 시스템: Agilent 1290 Infinity II UHPLC (G7120A 고속 이진 펌프, G7167B 멀티샘플러, G7116B 멀티컬럼 컬럼조절기, G7117B 다이오드 어레이 검출기)
• 검출기: SCIEX X500B HRMS, Agilent DAD (UV 280 nm)

핵심 기술 요소

• bioZen Native RP-5 컬럼은 모든 DAR 종류(DAR0-DAR8)를 포함한 위치 이성질체의 빠른 분리와 온라인 MS 식별을 가능하게 한다.
• HRMS 스펙트럼은 모든 주요 DAR 종류가 원래 상태로 엘루팅되는 것을 보여준다.
• 고해상도 질량분석기(HRMS)는 50 ppm 이하의 질량 오차를 가진 모든 주요 DAR 종류를 정확하게 식별한다.

응용 분야

• 항체-약물 콘jugate (ADCs): 다양한 ADC 개발 및 품질 관리 과정에서 사용 가능.
• 생물학적 제제: 원래 상태의 항체를 유지하면서 고분리능 질량 분석을 수행할 수 있다.

결론 및 권장사항

bioZen™ Native RP-5 컬럼은 시스테인 연결된 ADCs에 대한 모든 DAR 종류(DAR0-DAR8)와 위치 이성질체의 강력한 크로마토그래피적 분리와 온라인 MS 식별을 제공한다. HRMS 스펙트럼은 원래 상태에서 엘루팅되는 주요 DAR 종류를 잘 감지하고, 50 ppm 미만의 질량 오차로 모든 주요 DAR 종류를 정확하게 식별할 수 있다.

참고

• 주석: HRMS 조건 및 기타 상세 정보는 원문을 참조하십시오.

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