1. Impact란 무엇인가요? (Definition)

96시료 15분 처리, 누출 없는 신속 단백질 침전

Impact Rapid Protein Precipitation Plate는 Solvent Shielding Technology를 적용하여, 유기 용매를 플레이트 내부에 보유하고 단백질 침전물을 최대 25분간 가두어 두는 시료 전처리 플레이트입니다.

소유성(Oleophobic) 필터가 힘을 가하기 전까지 유기 용매의 누출을 방지하므로, 96시료를 15분 이내에 처리할 수 있습니다. Diclofenac, Naproxen, Amitriptyline, Metoprolol, Acetaminophen, Prednisone 등 산성·염기성·중성 화합물에서 88~92%(혈장, n=4)의 높은 회수율을 제공합니다.

2. 왜 Impact를 사용해야 하나요?

Solvent Shielding Technology

유기 용매를 플레이트 내부에 보유하고, 단백질 침전물을 최대 25분간 가두어 둡니다. 힘(원심분리, 진공, 양압)을 가하기 전까지 여과액이 누출되지 않습니다.

Oleophobic 필터가 유기 용매를 차단하여 플레이트 내부에서 침전이 완료됩니다.

96시료 15분 이내 처리

수동 또는 자동화된 여과액 전달(Transfer) 단계가 필요 없으므로, 96시료를 15분 이내에 처리할 수 있습니다. 기존 단백질 침전 워크플로우 대비 처리 시간을 줄입니다.

수동/자동 여과액 전달(Filtrate Transfer) 단계 불필요

누출 없는(Leak-Free) 설계

Oleophobic 필터가 유기 용매를 차단하여, 힘을 가하기 전까지 플레이트 하부로 누출이 발생하지 않습니다. 플레이트 내부에서 침전 반응이 완료됩니다.

유기 용매와 침전물을 최대 25분간 안정적으로 보유

자동화(Automatable) 가능

96-Well 플레이트 포맷으로 로봇 리퀴드 핸들러와 호환됩니다. 여과액 전달 단계가 없어 자동화 워크플로우 구성이 간편합니다.

로봇 리퀴드 핸들러와의 호환으로 높은 처리량(Throughput) 확보

3. 기술 사양 및 절차 (Technical Specs)

4단계 프로토콜과 제품 주문 정보를 확인하세요.

4단계 간편 프로토콜

유기 용매 분주

유기 용매(ACN 또는 MeOH)를 시료 부피의 3-4배 분주합니다. (안전 상한: 유기용매 ≤1.2 mL, 시료 ≤400 µL, 총 혼합액 ≤1.6 mL)

시료 추가

혈장 또는 조직 시료를 직접 추가합니다. 용매:시료 비율은 3:1 ~ 4:1 (v/v).

볼텍스 혼합

2분간 볼텍스(Vortex)하여 단백질 침전을 유도합니다.

여과(Filter)

원심분리(500g, 5분), 진공(2-7 inch Hg, 최대 5분 또는 여과액 수집 시까지), 또는 양압(2-5 psi) 중 선택합니다.

산·염기·중성 화합물 회수율

화합물	특성	회수율
Diclofenac	산성(Acid)	91%
Naproxen	산성(Acid)	90%
Amitriptyline	염기성(Base)	92%
Metoprolol	염기성(Base)	89%
Acetaminophen	중성(Neutral)	88%
Prednisone	중성(Neutral)	89%

제품 주문 정보

Part Number	제품명	포장
CE0-7565	Impact Protein Precipitation, Square Well, Filter Plate, 2 mL	2/pk
CE0-8201	Impact Starter Kit (Plate 2ea + Collection Plate 2mL 2ea + Sealing Mat Santoprene 2ea)	ea

여과(Filtration) 조건

방법	조건	시간
원심분리(Centrifuge)	500g	5분
진공(Vacuum)	2-7 inch Hg	5분
양압(Positive Pressure)	2-5 psi	-

4. 주요 응용 분야 (Applications)

생체분석(Bioanalytical)

혈장, 조직 등 생체 매트릭스에서 단백질을 신속하게 제거하여 LC-MS/MS 분석 전처리를 수행합니다. 산성, 염기성, 중성 화합물에서 높은 회수율을 제공합니다.

DMPK(약물동태)

약물 대사 및 약물동태(DMPK) 연구에서 대량의 생체 시료를 빠르게 처리합니다. 96-Well 포맷과 자동화 호환으로 높은 처리량을 확보할 수 있습니다.

임상 연구(Clinical Research)

임상 시료의 단백질 침전 전처리에 활용됩니다. 누출 없는 설계와 간편한 4단계 프로토콜로 분석 오류를 줄이고 재현성 있는 결과를 얻을 수 있습니다.

5. 분석 팁 (Expert Tips)

Q.용매:시료 비율은 어떻게 선택하나요?

A.3:1 (v/v) 비율은 시료 희석을 줄이는 장점이 있고, 4:1 (v/v) 비율은 더 완전한 단백질 침전을 보장합니다. 특히 메탄올(MeOH)을 사용할 경우 4:1 비율이 권장됩니다.

Q.여과 방법은 어떤 것을 선택해야 하나요?

A.원심분리(500g, 5분), 진공(2-7 inch Hg, 5분), 양압(2-5 psi) 중 실험실 장비 환경에 맞게 선택하시면 됩니다. 원문은 세 방법을 나열할 뿐 우열이나 동등성을 말하지 않습니다. 기존 워크플로우에 맞는 방법을 선택하시기 바랍니다.

Q.Solvent Shielding이 25분 이후에도 유지되나요?

A.Solvent Shielding Technology는 유기 용매와 단백질 침전물을 최대 25분간 플레이트 내부에 보유합니다. 시료 추가 후 25분 이내에 볼텍스 및 여과 단계를 완료하는 것이 권장됩니다.

6. 조건별 선택 도구 (Interactive Selector)

분석물 성질(산성·염기성·중성)과 시료 부피를 넣으면 유기용매 종류·비율과 well 용량 한계를 계산해 줍니다.

원문 대조 검증 수식 근거 검증

이 도구의 수치·조건·품번은 Phenomenex 원문과 대조 검증을 거쳤습니다(2026-09-23). 배지가 보증하는 범위는 「화면의 내용이 원문과 일치하는가」까지이며, 실제 조건에서 확인한 뒤 적용하세요.

Protein Precipitation Plate SelectorImpact™ Plates

Protein Precipitation (PPT) 메소드 빌더. 벤더 권장 시료인 plasma·tissue homogenate에서 단백질을 유기 용매로 침전·여과 제거하여 LC-MS/MS bioanalysis용 clean extract를 생성합니다. Phenomenex Impact™ Solvent Shielding Technology™ 기반 96-well plate workflow를 안내합니다.

궁금한 점 물어보기 Impact PPT Solution

⚠

본 도구는 교육·참고 목적입니다. Phenomenex 원문 2종의 핵심 요약만 제공하며(Sample Prep Guide BR27940322_W pp.12–15 · Impact Product Guide BR90870718_W — 회수율 «수치»·RSD·용량 한계·조직 회수율은 후자에만 있다 — 전자 p.15에도 같은 회수율 막대그래프가 있으나 값이 인쇄돼 있지 않다), 실제 분석은 application note 원문의 IS·QC·matrix effect 평가 절차를 따르세요. PPT는 단백질만 제거하므로 인지질 잔존이 우려되면 ④번 Phree(Phospholipid Removal) 또는 SLE를 검토하세요.

Step 1 — 시료 종류 선택

시료 종류 (Bioanalytical Matrix)

권장 시료량

100–200 µL

▣ 권장 비율

3:1 (organic:sample)

시료 전처리 노트

원심분리(3,000 g × 10 min)로 plasma fraction 분리. 항응고제(EDTA·heparin·citrate) 영향은 사전 검증. 동결 시료는 완전 해동·균질화 후 사용. 단백질 농도 60–80 mg/mL. ※ 이 전처리 조건은 일반 bioanalytical 관행이며 Impact 원문에는 없다.

Step 2 — 분석물 종류

염기성 분석물 · 권장 용매: ACN + 1% FA

원본 spiked plasma 회수율: Amitriptyline 92% · Metoprolol 89% (용매 미명시). 용매·비율(1% FA 첨가 ACN 3:1로 양성자화 → ESI+ sensitivity ↑)은 일반 bioanalytical 관행.

대표 화합물: β-Blockers (metoprolol, propranolol) / TCAs (amitriptyline, imipramine) / SSRIs (fluoxetine) / Opioids (codeine, tramadol)

Step 3 — 유기 용매 · 비율

※ 원본(Impact) 권장 유기 용매는 Acetonitrile·Methanol 2종입니다. +1% Formic acid는 염기성 약물 ESI+ 감도를 위한 일반 bioanalytical 관행으로, 벤더 자료에는 명시되지 않습니다.

Acetonitrile + 1% Formic Acid

장점

염기성 약물 양성자화 → ESI+ MS sensitivity ↑
단백질 침전 효율 유지 (ACN 3:1)
산성 조건에서 염기성 약물 이온화·용해도 안정

한계

Acid-labile 분석물(esters 등) 분해 가능
산성 분석물에는 부적합

Organic:Sample 비율 (권장 3:1)

Step 4 — 시료 부피 · 자동 부피 계산

시료 부피 (µL)

권장 범위 25–400 µL (벤더 최대 시료량 400 µL) · Well 2 mL, 총액 한계 1.6 mL

Sample

100 µL

Organic

300 µL

Total

400 µL

Step 5 — Plate 선택

Step 6 — Filtration 방법

원심분리 — 500 g × 5분 (또는 filtrate 완전 수집까지)

필요 장비: 96-well plate-compatible centrifuge (swinging bucket rotor)

표준 lab equipment 사용
추가 manifold 불필요
일관된 압력(본 도구 판단 — 원문에 없다)

Step 7 — 최종 추천

Impact Protein Precipitation, Square Well, Filter Plate

표준 square well filter plate, 2 mL well. 벤더 사양상 총 결합액(유기용매+시료)은 최대 1.6 mL.

CE0-7565

Solvent

ACN + 1% FA

Ratio

3:1

Total Vol.

400 µL

Filtration

원심분리

ℹ Solvent Shielding Technology™: Impact plate의 oleophobic membrane이 organic solvent을 최대 25분까지 leak 없이 유지(원문 up to) → in-well precipitation 후 filter. Standard PPT plate 대비 leak·sample loss 없음.

Step 8 — PPT Workflow (CE0-7565)

Impact 공식 4단계(Dispense·Add·Vortex·Filter) + Inject/Reconstitute(다운스트림)

Dispense

300 µL ACN + 1% FA을 plate well에 분주

Add

100 µL 시료를 forcefully 추가 (final ratio 3:1, total 400 µL)

Vortex

2분 max speed — 필수 단계. Solvent Shielding Technology™는 최대 25분까지 누설 없이 정치할 수 있게 할 뿐(원문 「can retain organic solvent with no leaks for up to 25 minutes」) vortex의 대안이 아니다(원문의 유일한 예외: liquid handler in-tip 침전)

Filter

원심분리 500 g × 5분 (또는 filtrate 완전 수집까지)

💡 96-well plate-compatible centrifuge (swinging bucket rotor)

Inject / Reconstitute

Filtrate를 LC-MS/MS 직접 주입 또는 N₂ 농축 후 재용해

* 96 시료를 15분 이내에 처리 가능 — 원문 표기 「clean 96 samples in under 15 minutes」(제품 설명 문구이며, 검증 결과 공표가 아니다). Liquid handler/robot 사용 시 in-tip aspirate/dispense cycle로 vortex 생략 가능.

회수율 — Spiked Plasma (Impact Product Guide BR90870718_W 「Absolute Recoveries」, n=4 인쇄값)

화합물	분류	회수율	RSD
Diclofenac	Acid	91%	12%
Naproxen	Acid	90%	4%
Amitriptyline	Base	92%	5%
Metoprolol	Base	89%	9%
Acetaminophen	Neutral	88%	5%
Prednisone	Neutral	89%	4%

※ Membrane non-specific binding 최소화 — spiked plasma 기준 acid·base·neutral 모두 ≥85% 회수율. 조직 균질액(tissue homogenate)은 원본 기준 68–77%로 더 낮으므로 매트릭스별 회수율 검증 필요.

PPT의 한계 — 언제 다른 방법으로?

인지질(Phospholipids) 잔존: PPT는 단백질만 제거 → 인지질이 LC-MS에서 ion suppression 유발 가능. 인지질도 함께 제거하려면 Phree (다음 ④) 사용.
염류·polar matrix 잔존: Salts가 ESI source contamination 유발 가능. 더 깊은 cleanup이 필요하면 SLE (②) 또는 SPE 권장.
고지방 시료: Tissue·dairy 등 지방 풍부 시료는 PPT 후에도 lipid 잔존 → SPE C18 cleanup 또는 SLE 결합.
저농도 분석물: PPT는 cleanup이 약해 LOD가 SPE 대비 ↑. Sub-ng/mL 분석에는 SLE/SPE 권장.

주의사항

본 도구는 교육·참고 목적으로 PPT 표준 워크플로우의 핵심 요약만 제공합니다. 실제 분석 전 Impact application notes의 IS·QC·matrix effect 평가 절차를 확인하세요.
매트릭스 효과: PPT는 단백질만 제거 → phospholipid 잔존이 LC-MS에서 ion suppression(특히 ESI+) 유발 가능. 인지질 제거가 필요하면 Phree (④)를 사용하세요.
비율 선택: 3:1은 「덜 희석된다」, 4:1은 「더 완전한 침전」 — 원문 각주는 비율과 sensitivity 를 연결하지 않는다. 4:1은 MeOH 또는 complete precipitation 우선. 비율 부족 시 단백질 잔존으로 LC system 막힘·column lifetime ↓.
Vortex 강도: 2분 max speed가 표준. 약하면 침전 불완전, 강하면 spillage 위험. Liquid handler 사용 시 in-tip aspirate/dispense로 대체 가능.
Sit Time: Solvent Shielding Technology™로 25분까지 sit 가능 — high-throughput 시 큐 처리 유리. 단, 일부 분석물은 시간 의존 분해 가능 → 검증 필요.
Filtration 선택: Centrifuge(표준 lab), Vacuum(빠름), Positive Pressure(자동화 호환). ※ 원문은 세 여과 방식을 나란히 제시할 뿐 우열을 말하지 않는다.
Part Number: Phenomenex 카탈로그 기준이며 주문 전 공식 채널에서 재확인 필수. 상표(Impact™, Solvent Shielding Technology™)는 Phenomenex의 자산이며 본 도구의 표기는 교육 목적의 nominative fair use입니다.

원문 출처

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이 페이지는 Phenomenex, Inc.가 공개한 기술 자료(애플리케이션 노트·테크니컬 노트·브로셔·카탈로그 등)를 바탕으로 컬럼피아(㈜성문시스텍)가 한국 분석 실무자를 위해 번역·해설·재구성한 것입니다. 원자료의 저작권은 Phenomenex, Inc.에 있으며, 한글 해설·구성의 저작권은 ㈜성문시스텍에 있습니다. 수치와 조건은 원자료가 제시한 시험 조건에서 얻은 값이며, 개별 제품의 최종 사양은 해당 제품의 사양서를 따릅니다.

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