Column Cleaning Reversed Phase for Intact Analysis: 일반 세척 절차: 1. 최소 20 컬럼 용량 동안 또는 정상 압력이 관찰될 때 아세토니트릴/물을 50:50으로 사용합니다. 2. 막힌 프릿은 역세척(컬럼을 역방향으로 세척)으로 제거할 수 있습니다. 3. 컬럼을 확인하기 위해 주입 전에 항상 공시료를 주입하십시오. 주입 후에도 공시료를 주입하는 것이 좋습니다. 대체 세척 절차: 1. 예를 들어, 마지막 주입이 완충액/아세토니트릴(75:25)로 끝났다면, 95:5 물/아세토니트릴로 시작하여 필요에 따라 유기물 함량을 단계적으로 증가시키는 것이 더 적절합니다(예: 물/아세토니트릴 75:25, 물/아세토니트릴 50:50, 물/아세토니트릴 5:95). 2. 소수성 또는 유성 물질의 경우, IPA로 플러싱해 보십시오. IPA를 사용할 때는 용매 점도가 높아져 역압이 높아지는 것을 방지하기 위해 저유량을 사용하십시오. Reversed Phase Peptide Analysis: 일반 세척 절차: 1. 최소 20 컬럼 부피 동안 또는 정상 압력이 관찰될 때 아세토니트릴/물을 50:50으로 혼합합니다. 2. 막힌 프릿은 역세척(컬럼을 역방향으로 플러싱)을 통해 제거할 수 있습니다. 3. 컬럼을 확인하기 위해 주입 전에 항상 공시료를 주입하십시오. 반드시 그럴 필요는 없지만, 세척 후에도 공시료를 주입하는 것이 좋습니다. 대체 세척 절차: 1. 소수성은 일반적으로 펩타이드 분석에서 문제가 되지 않지만, IPA를 사용하여 큰 사슬 및 기타 소수성 성분을 제거할 수 있습니다. HILIC: 일반 세척 절차: 1. 최소 20 컬럼 볼륨 또는 정상 압력이 관찰될 때 아세토니트릴/물을 50:50으로 혼합합니다. Oligo: 시스템의 마지막 용매 시스템에 가장 가까운 농도 구배로 세척하십시오. 예를 들어, 마지막 주입이 완충액/아세토니트릴(75:25)로 끝났다면, 95:5 물/아세토니트릴로 시작하여 필요에 따라 단계적으로 유기물 함량을 높이는 것이 더 적절합니다(예: 75:25 물/아세토니트릴; 50:50 물/아세토니트릴; 5:95 물/아세토니트릴). 소수성 또는 유성 물질의 경우 IPA로 플러싱해 보십시오. IPA를 사용할 때는 용매 점도가 높아져 역압이 높아지는 것을 방지하기 위해 저유량을 사용하십시오. 소수성이 매우 높은 물질의 경우, THF를 대신 사용하십시오. 컬럼 세척 후, 알킬아민 이온쌍이 입자 표면에서 제거되었을 가능성이 높습니다. 컬럼을 재조정하는 데는 30~40배의 컬럼 용량이면 충분하지만, 이온 페어링 농도가 낮은 경우(<2mM)에는 더 긴 조정 시간이 필요할 수 있습니다. Tips: 압력 상승이 관찰되면 아래에 표시된 유속을 줄여 컬럼을 역세척해 볼 수 있습니다. 0.1mL/분(직경 2.1mm 컬럼) 0.3mL/분(직경 3.0mm 컬럼) 0.5mL/분(직경 4.6mm 컬럼). THF로 플러싱하려면 스테인리스 스틸 라인이 필요합니다. 엔드 피팅이나 프릿을 제거하면 보증이 무효화됩니다. SEC/GFC: 일반 세척 절차: 1. 0.1M NaH₂PO₄ 완충액(pH 3.0)을 컬럼 부피의 10배로 시작합니다. 그 후 100% HPLC 등급의 물을 컬럼 부피의 최소 10배로 추가합니다. 역세척은 가능하지만, 유속을 저유량으로 줄여야 합니다(예: 1mL/분 방법 유량에서 0.5mL/분으로). 소수성 분석물: 100% 물에서 100% 아세토니트릴까지 30분 동안 저유량으로 기울기 세척합니다. 그런 다음 100% 아세토니트릴에서 100% 물까지 30분 동안 저유량으로 기울기 세척합니다. 2. 100% 물로 12시간 동안 하룻밤 동안 세척합니다. 강하게 흡착된 단백질 제거: 1. 0.5% SDS, 6M 티오시안산구아니딘 또는 10% DMSO 30mL를 사용하여 유속을 줄여 30분간 세척합니다. 2. 즉시 저유속으로 물로 하룻밤 세척합니다. 컬럼 재생: 1. 변성제(SDS, 티오황산구아니딘, 요소)에 노출시킨 후, 저유속으로 물로 하룻밤 세척합니다. 2. 변성제 처리 후 수용성 SEC 제조 표준물질로 컬럼을 테스트하여 컬럼 성능을 확인합니다. 그런 다음 표준물질을 주입하여 추가로 확인합니다. Weak Cation Exchange: 일반 세척 절차: 강하게 흡착된 화합물을 제거하기 위해 고염 용리액(예: 1M NaCl 완충액)을 컬럼 용량의 10~20배로 사용하여 컬럼을 세척합니다. 역압이 컬럼의 한계 내에 있는지 확인하고 유속을 적절히 낮춥니다. 대체 세척 절차: 고염 용리액 세척 후에도 여전히 잔류하는 단백질의 경우, 0.1 N HCl을 5~10 컬럼 부피로 사용하여 컬럼을 세척합니다. 20 mM MES, pH 6.5 또는 초기 이동상 조건에서 평형을 이룹니다. 20 mM NaOH를 5~10 컬럼 부피로 사용하여 컬럼을 세척합니다. 20 mM MES, pH 6.5 또는 초기 이동상 조건에서 평형을 이룹니다. 소수성으로 잔류하는 화합물의 경우, 50% 아세토니트릴을 5~10 컬럼 부피로 사용하여 컬럼을 세척합니다. 20 mM MES, pH 6.5 또는 초기 이동상 조건에서 평형을 이룹니다. 메탄올과 같은 알코올과 같은 양성자성 용매, 양이온성 세제, pH 및 온도가 극단적인 용매는 사용하지 마십시오. Column Regeneration bioZen Oligo: 헹굼: 95:5 아세토니트릴/물 이소프로판올 95:5 아세토니트릴/물