Charge Variant Analysis of NIST mAb using Native MS and bioZen 6 µm WCX Column.PDF

분야: 바이오제약

소개

이 문서는 NIST 모노클로날 항체의 전하 변이체 분석을 위해 bioZen™ 6 µm WCX 컬럼과 pH 기울기를 사용한 이온 교환 크로마토그래피 및 native MS 검출 방법에 대해 설명합니다. 주요 목적은 다양한 PTM(Post-translational Modifications)으로 인해 발생하는 전하 변이체를 효과적으로 분리하고 식별하는 것입니다.

실험 조건 (Experimental Conditions)

• 컬럼: bioZen 6 µm WCX
• 차원: 250 x 2.1 mm
• Part No.: 00G-4777-AN
• Recommended Guard: SecurityGuard™ ULTRA
• Guard Cartridge Part No.: AJ0-9850
• Guard Holder Part No.: AJ0-9000
• 이동상:
  • A: 20 mM Ammonium Acetate, pH 5.2
  • B: 5 mM Ammonium Acetate, pH 10.2
• 기울기: 60-100 % in 25 min
• 유속: 0.2 mL/min
• 온도: 30 °C
• 검출기: QTOF (SCIEX® X500B)
• 샘플: NIST mAb, 100 μg

핵심 기술 요소

• 이온 교환 크로마토그래피는 모노클로날 항체의 전하 변이성을 식별하는 강력한 방법이다.
• pH 기울기를 사용하여 안정적인 분리능을 달성할 수 있다.
• native MS 검출은 추가 PTM 생성 없이 정확한 분석 결과를 제공한다.

응용 분야

• NIST 모노클로날 항체의 전하 변이체 분석
• 다양한 PTM으로 인해 발생하는 전하 변이체 식별

결론 및 권장사항

본 연구는 bioZen™ 6 µm WCX 컬럼과 pH 기울기를 사용한 이온 교환 크로마토그래피를 통해 NIST 모노클로날 항체의 다양한 전하 변이체를 효과적으로 분리하고 식별할 수 있음을 보여주었다. 향후 연구에서는 이러한 방법을 다른 단백질 및 항체 시스템에 확장하여 적용하는 것이 권장된다.

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