Reproducible LC-MS-MS Separation of 38 Amino Acids in HILIC Mode using a Biozen Glycan LC Column.PDF

분야: 바이오제약

소개

아미노산은 단백질의 구성 요소로, 분리 및 정량화가 어려운 복잡한 화합물 그룹입니다. HPLC는 아미노산 분석에 널리 사용되는 방법이지만, LC-MS를 이용한 아미노산 분석에는 여러 가지 도전 과제가 있습니다: 1) 일부 화합물은 매우 극성으로 역상 HPLC에서 유지하기 어렵고, 2) 이소체는 공침하여 서로 구분하기 어려우며, 3) HILIC 기반 분리법은 효과적이지만 재현성이 떨어질 수 있습니다. 이러한 문제를 해결하기 위해 bioZen Glycan HILIC phase LC 컬럼과 SWATH® Acquisition을 결합하여 38가지 아미노산의 고도로 재현적인 분리와 정확한 정량화 및 확인이 이루어졌습니다.

실험 조건 (Experimental Conditions)

• 컬럼: bioZen Glycan, 2.6 µm
• 차원: 100 x 2.1 mm
• 부품 번호: 00D-4773-AN
• 탈착 유형: 경사도 (Gradient)
• 이동상:
  • A: 아세토니트릴에 있는 10 mM 암모늄 포르메이트
  • B: 물에 있는 10 mM 암모늄 포르메이트
• 경사도:
  • 시간 (분): 0.01, %B: 0
  • 시간 (분): 2, %B: 5
  • 시간 (분): 7, %B: 50
  • 시간 (분): 8, %B: 50
  • 시간 (분): 8.1, %B: 0
  • 시간 (분): 12, %B: 0
• 유속: 500 µL/min
• 온도: 40 °C
• 시스템: TripleTOF® 6600 coupled with an ExionLC™ system (SCIEX)
• MS 획득 방법: SWATH® Acquisition
• MS 검출기 설정: MS/MS

핵심 기술 요소

• HILIC 모드는 아미노산의 극성 및 수용성을 고려하여 역상 분리보다 더 나은 유지능과 이소체의 기저선 분리를 제공합니다.
• bioZen Glycan LC 컬럼을 사용한 분리는 다양한 조건에서 재현성이 검증되었습니다 (일간, 일내, 배치 간 및 여러 주입 부피).
• SWATH® Acquisition을 이용하여 정확한 아미노산 정량화가 가능하며, 이는 다양한 생물학적 매트릭스에서도 적용할 수 있습니다.

응용 분야

• 바이오제약 산업에서의 아미노산 분석 및 정량화.
• 다양한 생물학적 샘플에서의 고도로 재현적인 HILIC 기반 LC-MS/MS 분리법 활용.

결론 및 권장사항

bioZen Glycan LC 컬럼과 SWATH® Acquisition을 사용한 방법은 38가지 아미노산에 대한 성공적이고 강건하며 재현 가능한 분리를 제공합니다. 이 방법은 다양한 조건에서의 검증으로 인해 신뢰성이 높으며, MS 감지법을 통해 정확한 아미노산 정량화를 가능하게 합니다. 향후 연구에서는 이러한 기술이 더 많은 생물학적 샘플에 적용될 수 있을 것으로 예상됩니다.

주의사항

• 모든 수치와 단위는 원문 그대로 사용해야 하며, 변환하거나 수정해서는 안 됩니다.
• 에난티오머 (거울상 이성질체), 키랄 (Chiral), 고정상 (Stationary Phase), 이동상 (Mobile Phase), 분리능 (분리능), 머무름 시간 (Retention time) 등의 용어는 지정된 한국어 명칭으로 번역해야 합니다.
• 제품명, 화학 물질명 및 회사명은 영문 그대로 표기해야 합니다.

이 요약은 원문 문서를 기반으로 자동 생성되었습니다.